[发明专利]来源于嗜清洁细小杆菌卤醇脱卤酶突变体及其应用有效
申请号: | 201510097839.6 | 申请日: | 2015-03-05 |
公开(公告)号: | CN104745557B | 公开(公告)日: | 2017-09-22 |
发明(设计)人: | 柳志强;郑裕国;万南微;沈寅初 | 申请(专利权)人: | 浙江工业大学 |
主分类号: | C12N9/88 | 分类号: | C12N9/88;C12P7/62;C12R1/01 |
代理公司: | 杭州天正专利事务所有限公司33201 | 代理人: | 黄美娟,李世玉 |
地址: | 310014 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明提供了嗜清洁细小杆菌卤醇脱卤酶的突变体以及突变体在阿托伐他汀中间体合成中的应用,本发明通过建立高通筛选方案,对卤醇脱卤酶定向改造,获得突变体F176M/A187R,其活力相对于野生型卤醇脱卤酶提高了3.11倍。突变体F176M/A187R全细胞催化100g/L(S)‑4‑氯‑3‑羟基丁酸乙酯合成(R)‑4‑氰基‑3‑羟基丁酸乙酯,可获得86%的摩尔产率。 | ||
搜索关键词: | 来源于 清洁 细小 杆菌 卤醇脱卤酶 突变体 及其 应用 | ||
【主权项】:
一种来源于食清洁剂细小棒菌的卤醇脱卤酶突变体,其特征在于所述卤醇脱卤酶突变体为下列之一:(1)将SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的第176位苯丙氨酸突变成甲硫氨酸;(2)将SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的第187位丙氨酸突变成精氨酸;(3)将SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的第187位丙氨酸突变成丝氨酸;(4)将SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的第176位苯丙氨酸突变成甲硫氨酸,同时将SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的第187位丙氨酸突变成精氨酸;(5)将SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的第176位苯丙氨酸突变成甲硫氨酸,同时将SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的第187位丙氨酸突变成丝氨酸。
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