[发明专利]人多能干细胞向生殖细胞分化的无动物源组分培养方法有效

专利信息
申请号: 201510094574.4 申请日: 2015-03-03
公开(公告)号: CN104726400B 公开(公告)日: 2018-02-23
发明(设计)人: 王媛;赵云程;马庆;孔睿佼;龚雪萍 申请(专利权)人: 华东师范大学
主分类号: C12N5/076 分类号: C12N5/076
代理公司: 上海麦其知识产权代理事务所(普通合伙)31257 代理人: 董红曼
地址: 200062 上*** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明公开了一种用于男性来源多能干细胞向生殖细胞分化的无动物源性组分培养方法,在无血清、无动物源性蛋白培养液的条件下,使男性来源多能干细胞在体外分化过程中产生类精原干细胞、单倍体细胞。本发明还公开了一种无血清、无动物源性蛋白培养液体系。本发明提出的无血清、无动物源蛋白培养方法,操作简单、可重复性强,具有广泛的临床应用价值,为生殖细胞发生机理研究,及男性非梗阻性无精子症的诊断、治疗提供了基本技术平台。
搜索关键词: 多能 干细胞 生殖细胞 分化 动物 组分 培养 方法
【主权项】:
一种人多能干细胞向生殖细胞分化的无动物源组分培养方法,其特征在于,在无血清、无动物源性蛋白培养液的条件下,使男性来源多能干细胞在体外分化过程中产生类精原干细胞、单倍体细胞,其中,所述男性来源多能干细胞不直接来源于胚胎;其中,所述无血清、无动物源性蛋白培养液为无血清、无动物源性蛋白培养液II:所述无血清、无动物源性蛋白的培养液II包括:MEM培养基;青霉素/链霉素双抗溶液 1%;L‑谷氨酰胺 2mM;4‑羟乙基哌嗪乙磺酸 10mM;胰岛素‑转铁蛋白‑硒‑X添加物 1%;无异源成分的血清替代物 0.2‑3%;碱性成纤维细胞生长因子 1ng/mL;重组人神经胶质源神经营养因子 10‑40ng/mL;维生素C 50‑200ug/mL;脂质浓缩物 0.1‑0.2%。
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