[发明专利]牦牛流产衣原体灭活疫苗及其制备方法

摘要

本发明公开一种牦牛流产衣原体病预防用灭活疫苗的制备方法，以及这种疫苗和制备过程中的所用的缓冲液及佐剂。本发明的牦牛流产衣原体灭活疫苗的制备方法是将牦牛流产衣原体菌的抗原用pH7.2的SPG缓冲液稀释20倍，按稀释后抗原量的0.2%加入浓度37%的甲醛充分灭活，再将灭活后的抗原与佐剂按1：1比例混合、摇均匀并充分乳化得到所要求的疫苗。本发明的疫苗可以使被接种的牦牛产生对流产衣原体的感染进行有效的抵抗，且免疫效果优于现有技术的疫苗。

主权项

1.牦牛流产衣原体灭活疫苗的制备方法，其特征在于，牦牛流产衣原体菌株接种于无衣原体感染的种鸡群所产的37℃孵化的6‑7日龄鸡胚，传1‑2代进行增殖，再以接种后死亡鸡胚培养物为疫苗种毒，将衣原体抗体阴性产蛋种鸡群所产的种蛋表面清洗消毒后，37℃孵化6‑7天，将种毒用pH7.2的SPG缓冲液10000倍稀释在无菌环境里，经卵黄囊途径接种鸡胚，收获接种后72小时死亡鸡胚的卵黄膜和尿囊液作为制苗用抗原，将检验合格的制苗用抗原捣碎过滤，将滤液用pH7.2的SPG缓冲液稀释20倍，按稀释后抗原量的0.2％加入浓度37％以上的甲醛充分灭活，再将灭活后的抗原与油佐剂按1：1比例混合、摇均匀并充分乳化得到所要求的疫苗，所用的油佐剂为MONTANIDE ISA 201佐剂；乳化时采用四叶搅拌器，剪切力为350rpm，乳化时间为5分钟；所述SPG缓冲液由：Sucros 75g，KH2PO40.52g，Na2HPO4，1.22g，L‑Glutamic，0.72g和水1L组成。