[发明专利]一种促肝细胞生长素原液及冻粉针剂的制备方法

摘要

本发明公开了一种促肝细胞生长素原液及冻粉针剂的制备方法。包括：取乳猪肝脏清洗切碎，沥血水，洗涤，细胞破碎，冻结；解冻，加水定容，调pH6.0～7.5，水浴加热80±2℃，过滤离心后取上清液冷却；60kd滤膜过滤后用超滤膜超滤；RO膜连续浓内循环缩；-20℃以下冻结，解冻，过滤；用超滤膜超滤，无菌分装，-20℃以下冻结保存。原液解冻，加入赋形剂，0.2μm膜除菌过滤，灌装制品温度达到-40℃以下时，继续降温，冷凝器达到-50℃以下时，抽真空，干燥，真空压塞。本发明的提取率高、时间短、所得小分子肽含量较高，反相肽图色谱鉴别指纹图谱相似度＞0.90、所得促肝细胞生长素原液多肽含量≥38mg/ml、多肽回收率≥92%、活力检测刺激指数≥5.0。

主权项

一种促肝细胞生长素原液的制备方法，其特征在于包括以下步骤：⑴取新鲜健康乳猪肝脏纯化水清洗、去结缔组织杂质，切碎，0～10℃冷库内沥血水，取出加纯化水洗涤，按1:1～1.5的体积比加入＜10℃纯化水胶体磨匀浆，细胞破碎，分装于合适容器内，‑20℃以下冻结48小时以上；⑵解冻，加纯化水按照乳猪肝1:2～2.5定容，调pH6.0～7.5,水浴加热80±2℃，15‑20分钟, 过滤离心后取上清液冷却至10～20℃；⑶用60kd滤膜过滤后用截留分子量10000道尔顿的超滤膜超滤,即为促肝细胞生长素粗提液；用RO膜连续浓内循环缩至乳猪肝重量的1/2‑1/3；⑷‑20℃以下冻结48小时以上，解冻，过滤去除沉淀；⑸用截留分子量10000道尔顿的超滤膜超滤,除菌过滤后无菌分装， 即为促肝细胞生长素原液；‑20℃以下冻结保存。