[发明专利]表达重组抗体CHO细胞系稳定性的早期鉴定方法有效
| 申请号： | 201510056258.8 | 申请日： | 2015-06-04 |
| 公开（公告）号： | CN104833625B | 公开（公告）日： | 2018-02-23 |
| 发明（设计）人： | 胡伶俐;周祥;王瑞;张敬;范克索;周鹏飞 | 申请（专利权）人： | 武汉友芝友生物制药有限公司 |
| 主分类号： | G01N15/14 | 分类号： | G01N15/14 |
| 代理公司： | 北京高文律师事务所11359 | 代理人： | 程义贵 |
| 地址： | 430075 湖北省武汉市中国武汉*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明提供一种表达重组抗体的CHO细胞系稳定性的早期鉴定方法，所述方法包括如下步骤1)通过细胞诱导凋亡剂处理表达重组抗体的CHO细胞系，得到诱导凋亡后的CHO细胞系；2)然后通过胞内流式细胞术分析所述诱导凋亡后的CHO细胞系；3)根据胞内流式细胞术分析的结果，计算平均荧光强度和荧光强度分布峰型图，通过荧光强度分布峰型图和CHO细胞系的产量的相关性，及所述峰型图确定CHO细胞系的稳定性。本发明的方法，相比传统的细胞系稳定性鉴定方法，流式法则能在早期判定细胞系的稳定性，无需再进行产量评估，可以节省较多的时间、人力和实验试剂耗材的消耗。此外，该方法还具有高通量的特点。 | ||
| 搜索关键词： | 表达 重组 抗体 cho 细胞系 稳定性 早期 鉴定 方法 | ||
【主权项】：
一种表达重组抗体的CHO细胞系稳定性的早期鉴定方法，所述方法包括如下步骤：1)通过细胞诱导凋亡剂处理传代次数不超过15代的表达重组抗体的CHO细胞系，得到诱导凋亡后的CHO细胞系；2)然后对凋亡后的CHO细胞系进行胞内重组抗体的荧光染色并进行流式细胞术检测及分析；3)根据胞内流式细胞术分析的结果，计算平均荧光强度和荧光强度分布峰型图，通过荧光强度分布峰型图和CHO细胞系的产量的相关性，及所述峰型图确定CHO细胞系的稳定性。
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