[发明专利]一种蓝耳病疫苗抗原纯化的方法有效
| 申请号： | 201510056212.6 | 申请日： | 2015-02-03 |
| 公开（公告）号： | CN104673761B | 公开（公告）日： | 2017-07-18 |
| 发明（设计）人： | 黄文强;丁锦茂;潘德春;杨君敬;吴宗学;王贺民 | 申请（专利权）人： | 乾元浩生物股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N7/04 | 分类号： | C12N7/04 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司11002 | 代理人： | 王文君 |
| 地址： | 100070 北京市丰台区南*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种蓝耳病疫苗抗原纯化的方法，属于生物制品制备技术领域。该纯化方法包括如下步骤(1)将收获的蓝耳病疫苗抗原离心澄清；(2)将步骤(1)得到的澄清抗原泵入超滤系统中进行纯化；(3)用缓冲液将步骤(2)中纯化得到的抗原液稀释至原体积继续纯化；(4)用缓冲液将步骤(3)中纯化得到的抗原液稀释至原体积继续纯化一段时间后，收获纯化的蓝耳病疫苗抗原。该方法对于降低蓝耳病疫苗的免疫副反应以及提高疫苗产品质量具有积极的意义。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 蓝耳病 疫苗 抗原 纯化 方法 | ||
【主权项】：
一种蓝耳病疫苗抗原纯化的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将收获的蓝耳病疫苗抗原经离心机离心澄清，收取澄清的抗原液；所述的蓝耳病疫苗抗原为经灭活剂灭活后的蓝耳病灭活疫苗抗原或蓝耳病活疫苗抗原；其中，步骤(1)采用差速离心的方法，所述差速离心为先采用4000‑7000rpm离心20‑40min，取上清弃沉淀，然后将上清液以8000‑12000rpm离心50‑70min，取上清备用；(2)将步骤(1)得到的澄清抗原液泵入超滤系统进行纯化；其中，步骤(2)中超滤系统为切向流超滤系统，所述切向流超滤系统膜包的分子量大小为300KD；抗原液泵入超滤系统进行纯化时，抗原液循环进入超滤膜包的流速不超过0.8ml/min/cm2，纯化的同时需要将抗原液浓缩至原体积1/10以上，收取回流液，弃去透过液；(3)用0.01M pH值7.2‑7.4的PBS缓冲液将步骤(2)中纯化得到的抗原液稀释至原体积继续纯化，纯化方法同步骤(2)；(4)用0.01M pH值7.2‑7.4的PBS缓冲液将步骤(3)中纯化得到的抗原液稀释至原体积继续纯化后，收获纯化的蓝耳病疫苗抗原。
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