[发明专利]中华猕猴桃Hort 16A后代优良品系组培苗多倍体诱导方法

摘要

中华猕猴桃Hort 16A 后代优良品系组培苗多倍体诱导方法，本发明步骤包括将 Hort 16A后代品系组培苗的叶片浸泡于秋水仙碱水溶液中诱导多倍体，洗净叶片，按步骤接种到愈伤分化增值培养基及继代培养基中光照培养等。本发明操作简单，诱导定向性好、诱导成功率高，成本低，培养周期较短，诱变率较高，为中华猕猴桃多倍体育种提供一种高效可行的新方法，具有重要的应用价值，推广本发明多倍体育种方法将给果农种植带来经济收益，满足更多消费者需求。

主权项

中华猕猴桃Hort 16A 后代优良品系组培苗多倍体诱导方法，包括以秋水仙碱水溶液作为多倍体诱变剂，进行愈伤分化增殖培养以及继代培养，其特征是：（1）将生长良好的无菌苗取下叶片，并切成1cm2的小块，常温下浸泡在经过滤灭菌且浓度为20‑100mg/L的秋水仙碱水溶液中诱变多倍体，6‑30小时后取出，用无菌水洗净；（2）将步骤（1）浸渍后的叶片转接到不含秋水仙碱的愈伤分化增殖培养基中，叶片露在培养基上，且平铺整齐使其与培养基充分接触，叶片光照培养20天，待长出愈伤后转瓶到新的增殖培养基中，新的增殖培养基与上述增殖培养基组份相同，所述增殖培养基为：MS+0.5 mg/L NAA+5 mg/L 6‑BA+蔗糖30g/L +琼脂 5 g/L，pH5.8；所用试剂全称：NAA，1‑naphthyla‑cetic acid，萘乙酸；6‑BA，6‑Benzylaminopurine，6‑苄氨基腺嘌呤；培养条件：培养室温度25±1℃，光周期：16h光照/8h黑暗，相对湿度40%‑80%；培养4周，待发芽并长成小植株时进行筛选，继代到步骤（3）新鲜的继代培养基中；（3）将步骤（2）长成的小植株在新鲜的继代培养基上培养2‑4次后，从中选择变异形态比较明显的植株进行鉴定，然后对鉴定为多倍体的植株进行扩繁，该继代培养基为：MS+0.5 mg/L NAA+5 mg/L 6‑BA+蔗糖30 mg/L +琼脂 5 mg/L，pH5.8；      培养条件：培养室温度25±1℃，光周期：16h光照/8h黑暗，相对湿度40%‑80%，培养4周。