[发明专利]用于产生工程化心肌(EHM)的方法有效
| 申请号： | 201480057991.5 | 申请日： | 2014-08-22 |
| 公开（公告）号： | CN105745321B | 公开（公告）日： | 2019-12-13 |
| 发明（设计）人： | W-H·齐默尔曼;M·蒂布尔齐;J·哈德森 | 申请（专利权）人： | 修复股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 11382 北京瑞恒信达知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 曹津燕;张伟 |
| 地址： | 德国*** | 国省代码： | 德国;DE |
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| 摘要： | 本发明提供了用于在化学充分限定的完全符合GMP规定的条件和化合物下产生工程化心肌(EHM)的新方法。得到的人心肌生成力，并显示出心肌的典型特性。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 产生 工程 心肌 ehm 方法 | ||
【主权项】：
1.一种用于产生工程化心肌(EHM)的方法，所述方法包括下述步骤：/n(i)在一个或多个模具中提供无血清重构混合物，所述重构混合物包含(a)无血清最少必需培养基；(b)无血清补充剂，得到0.5-50mg/ml白蛋白、1-100μg/ml转铁蛋白、0.1-10μg/ml乙醇胺、0.003-0.3μg/ml亚硒酸钠、0.4-40μg/ml盐酸左旋肉碱、0.1-10μg/ml氢化可的松、0.05-5μl/ml脂肪酸补充剂、0.0001-0.1μg/ml三碘-L-甲状腺原氨酸(T3)和0.2-2mg/ml胶原蛋白的终浓度；和(c)人心肌细胞和人非肌细胞的混合物，其中总细胞混合物的20％到80％是人心肌细胞；/n其中所述心肌细胞不是使用涉及修改人类生殖系遗传特性或者涉及为工业或商业目的使用人胚胎的过程产生的；/n其中所述重构混合物的pH为7.2到7.6；/n(ii)在所述一个或多个模具中培养所述无血清重构混合物，由此使所述无血清重构混合物凝结至少15分钟；/n(iii)在所述一个或多个模具中，在无血清EHM培养基中培养步骤(ii)中获得的混合物，直至所述混合物凝结到至少50％的其初始厚度，其中所述EHM培养基包含(a)含有0.5-3mmol/L Ca
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