[发明专利]一种γ -谷氨酰转肽酶与伴侣蛋白共表达重组质粒构建方法及应用在审
| 申请号： | 201410812443.0 | 申请日： | 2014-12-23 |
| 公开（公告）号： | CN104560849A | 公开（公告）日： | 2015-04-29 |
| 发明（设计）人： | 殷志敏;王期;蒋毅;兰蕾 | 申请（专利权）人： | 南京师范大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12P13/04;C12R1/19 |
| 代理公司： | 南京知识律师事务所 32207 | 代理人： | 卢亚丽 |
| 地址： | 210097 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种重组谷氨酰转肽酶共表达质粒的构建方法和应用、一种高效累积茶氨酸的方法。本发明通过伴侣蛋白与带有GST标签的谷氨酰转肽酶的共表达，成功构建了一株具有极高谷氨酰转肽酶酶活的大肠杆菌基因工程菌BL21/C4，共表达后最佳酶活达到15500U/L。使用本发明方法可以明显的提高酶的表达量及酶活，促进底物的转化，进而提高茶氨酸的生产量。同时，缩短了工艺周期(酶活性好)，降低了生产成本(降低酶促反应中酶耗成本)，易操作，易放大，稳定性好，适于大规模工业化生产，为生物酶法生产其它有价值的产品提供了新的思路。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 谷氨酰转 肽酶 伴侣 蛋白 表达 重组 质粒 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种具有谷氨酰转肽酶酶活的大肠杆菌基因工程菌，其特征在于：该基因工程菌是以大肠杆菌BL21(DE3)为宿主菌，宿主菌中共转化有伴侣蛋白表达质粒pG‑Tf2与谷氨酰转肽酶表达质粒。
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