[发明专利]间接ELISA检测牛肠道病毒2型抗体的检测试剂盒在审
申请号: | 201410581424.1 | 申请日: | 2014-10-28 |
公开(公告)号: | CN105886496A | 公开(公告)日: | 2016-08-24 |
发明(设计)人: | 吴丹;刘艳华;郭金玉;谷强;高志强;吴涛;张鹤晓;张乐萃;郭铮蕾;韩玥;范斐;徐姗;汪琳;张伟;蒲静;乔彩霞;柏亚铎 | 申请(专利权)人: | 中华人民共和国北京出入境检验检疫局;中国兽医药品监察所 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;G01N33/68;G01N33/535 |
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地址: | 100026*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种采用人工克隆、表达的重组牛肠道病毒2型VP1+蛋白,在原核系统中高效表达、纯化,以此为抗原建立了检测牛肠道病毒2型特异性抗体的间接ELISA方法,并研制出试剂盒,适用于对牛血清中的牛肠道病毒2型抗体进行检测,属于动物检验检疫领域。本发明的优点是:1)简便快速:可快速的对活牛体内的牛肠道病毒2型抗体作出评价。2)特异:与常见的牛病毒性疾病IBRV、BVDV、BLV的阳性血清不发生交叉反应。3)稳定:重复性试验结果显示所建立方法的稳定性良好。4)安全:不接触病毒,不具有生物安全问题。 | ||
搜索关键词: | 间接 elisa 检测 肠道病毒 抗体 试剂盒 | ||
【主权项】:
设计特异性引物,采用RT‑PCR方法扩增BEV‑2包含VP1(840bp)蛋白基因片段的VP1+(1275bp)序列,并于原核载体pET‑32a实现其高效表达。下面为扩增时设计的引物序列:BEV2‑VP1‑f:5′‑CCGGAATTCTGGGATTTCGGGCTAC‑3′BEV2‑VP1‑r:5′‑CCCAAGCTTTCACACCACTAGTACAG‑3′
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