[发明专利]一种聚合含抗三种病害基因的水稻选育方法

摘要

本发明公开了一种聚合含抗三种病害基因的水稻选育方法。本发明采用分子标记辅助选择技术、花药培养与常规育种技术相结合，快速实现抗白叶枯病基因Xa23、抗稻瘟病基因Pi-1与抗条纹叶枯病基因Stvb-i的聚合。结果表明：所获得的聚合三种抗病基因的花培材料所含的抗病基因，均能稳定遗传，且高效抗病。本发明的水稻选育方法创造出一批抗性稳定的水稻新种质资源，为水稻抗病育种提供了物质基础。

主权项

一种聚合含抗三种病害基因的水稻选育方法，其特征在于按如下的步骤进行：（1）抗两种病害基因的聚合：用含有抗白叶枯病Xa23基因的BG152和含有抗稻瘟病Pi‑1基因的R118分别与含抗条纹叶枯病Stvb‑i基因的花育409通过有性杂交进行双抗病基因聚合，分别获得含抗白叶枯病Xa23基因与抗条纹叶枯病Stvb‑i基因的F₀种子和含抗稻瘟病Pi‑1基因与抗条纹叶枯病Stvb‑i基因的F₀种子；（2） 抗三种病基因的聚合：利用分子标记分别对含抗白叶枯病Xa23基因与抗条纹叶枯病Stvb‑i基因的F₁植株和含抗稻瘟病Pi‑1基因与抗条纹叶枯病Stvb‑i基因的F1植株鉴别真假杂种，然后再将两个带有双抗抗病基因的真杂种彼此杂交，获得含抗白叶枯病Xa23基因、抗稻瘟病Pi‑1基因与抗条纹叶枯病Stvb‑i基因的复交F₀种子；（3）含抗三种病害基因杂合型聚合体的获得：按划格方式稀播复交F₁群体，于3叶期对所有单株逐株取叶提取DNA，再采用与三种抗性基因紧密连锁的分子标记检测各个体的抗性基因，从中筛选出聚合了含抗三种病害基因型的杂合型个体；（4）含抗三种病害基因杂合型聚合体的花药培养：从筛选出的聚合了含抗三种病害基因型的个体中，进一步选择农艺性状比较好的个体进行花药培养，获得花培一代H₀；（5）含抗三种病害基因的纯合型聚合体的获得：花培一代H₀自然加倍，收获二倍体植株种子；按划格方式稀播二倍体植株种子，于3叶期对所有个体取叶提取DNA，再采用与三种抗性基因紧密连锁的分子标记检测各个体的抗性基因，从中筛选出聚合了含抗三种病害基因的纯合型聚合体花培植株，按株系收种；（6）含抗三种病害基因的纯合型聚合体的选育：播种所有含抗三种病害基因的纯合个体，每个播种量为50‑100g；移栽时将其分成四份，一份用于人工接种的白叶枯病接种鉴定，一份采用在病区种植进行条纹叶枯病鉴定，一份用于人工接种结合病区种植进行稻瘟病鉴定，一份种在水田考察农艺性状和测产，最终根据PCR检测与抗病鉴定结果，筛选出聚合三种抗病基因、抗三种病害且综合农艺性状优异的个体。