[发明专利]一种通过三维荧光光谱优化超声条件提取胞外聚合物的方法

摘要

一种通过三维荧光光谱优化超声条件提取胞外聚合物的方法属于污水生物处理活性污泥组分分析领域。本发明通过三维荧光光谱图分析活性污泥紧密附着型胞外聚合物的提取程度及细胞破裂程度，优化超声条件。污泥在梯度离心提取黏液和松散附着型胞外聚合物后，超声提取紧密附着型胞外聚合物，离心或超声后的水样经滤膜过滤稀释后由三维荧光光谱仪分析。采用氙弧灯为激发光源，将扫描后得到的荧光强度减去水的空白荧光强度，得到样品三维荧光光谱。将扣除空白后的激发波长260～280nm与发射波长360～375nm范围内荧光数值进行平均，依靠可溶性微生物产物类蛋白物质的平均荧光强度变化，评价紧密附着型胞外聚合物提取程度和细胞破碎情况的方法。

主权项

一种通过三维荧光光谱优化超声条件提取胞外聚合物的方法，其特征在于，包括以下步骤：取活性污泥混合液，在4℃以2000g的离心力离心15分钟，得到细胞黏液Slime；将Slime倒去，加入磷酸盐缓冲液至活性污泥混合液的原体积，在4℃以4000g的离心力离心15分钟，上清液即为LB‑EPS；再次加入PBS至原体积后，混合均匀，在不同强度和不同时间下超声；离心或超声后的水样经0.45微米滤膜过滤稀释后由三维荧光光谱仪分析测定；三维荧光光谱扫描测定条件：采用氙弧灯为激发光源，激发波长200～450nm，发射扫描波长220～600nm，激发和发射狭缝宽度为5～15nm，激发波长扫描间隔为0.5～10nm，扫描速度为900～1500nm/min；将样品的荧光强度减去同条件下蒸馏水的三维荧光值，合成三维荧光光谱图；优化不同超声条件提取TB‑EPS：将扣除空白后的激发波长260～280nm与发射波长360～375nm范围内荧光数据进行平均，得到类蛋白质可溶性微生物产物平均荧光强度；以超声强度和超声时间为平面二维坐标，平均荧光强度为纵坐标，绘制三维立体关系图；平均荧光强度突变时对应的超声条件为提取TB‑EPS最佳条件。