[发明专利]一种纳米金酶传感器检测水中亚硝酸盐的方法

摘要

一种纳米金酶传感器检测水中亚硝酸盐的方法，包括以下步骤⑴将裸金电极浸入1,6‑己二硫醇的乙醇溶液中；⑵再将裸金电极浸入纳米金溶液中修饰；⑶将电极浸入辣根过氧化物酶的磷酸盐缓冲溶液中避光修饰；⑷绘制亚硝酸盐检测的标准曲线；⑸检测，计算出待测溶液中亚硝酸盐的浓度。本发明不仅利用纳米金粒子对辣根过氧化物酶的强吸附作用，提高了电极上辣根过氧化物酶的负载量，而且纳米金粒子能够活化修饰电极表面，加速修饰电极上电子的转移，使响应电流增大，拓展线性范围。采用本发明的方法，检测水中亚硝酸盐，线性范围宽，水中亚硝酸盐回收率在96.5％～105％之间。

主权项

一种纳米金酶传感器检测水中亚硝酸盐的方法，其特征在于，包括以下步骤：⑴ 将裸金电极浸入1,6‑己二硫醇的乙醇溶液中10‑15小时；分别用无水乙醇和超纯水从侧面冲洗掉金电极表面物理吸附的1,6‑己二硫醇；⑵ 将经步骤（1）修饰上1,6‑己二硫醇的裸金电极浸入纳米金溶液中，2‑6℃避光修饰10‑15小时；用超纯水从侧面冲洗掉物理吸附的纳米金粒子；⑶ 将经步骤（2）纳米金修饰的电极浸入辣根过氧化物酶的磷酸盐缓冲溶液中；2‑6℃避光修饰10‑15小时；HRP通过静电吸附作用固定于纳米金粒子上，然后将电极用浓度为0.08－0.12 mol/L，pH为6.8‑7.2的磷酸氢二钾‑磷酸二氢钾缓冲溶液冲洗干净，得到可用于亚硝酸盐检测的辣根过氧化物酶生物传感器，标记为Au电极‑HDT‑纳米金‑HRP修饰电极；所述辣根过氧化物酶的磷酸盐缓冲溶液中，辣根过氧化物酶为4－6 mg/mL，pH为6.8‑7.2；所述磷酸盐缓冲溶液为磷酸氢二钾‑磷酸二氢钾溶液，浓度为0.08－0.12 mol/L，pH为6.8‑7.2;⑷ 以步骤（3）制备的Au电极‑HDT‑纳米金‑HRP修饰电极为工作电极，采用循环伏安法得到HRP修饰电极在不同浓度亚硝酸盐溶液中的响应电流，亚硝酸盐浓度与相应的响应电流之间的函数关系即亚硝酸盐检测的标准曲线；⑸以步骤（3）制备的Au电极‑HDT‑纳米金‑HRP修饰电极对亚硝酸盐待测溶液进行检测，工作电位选用E= 0.70‑0.80V，得到的响应电流根据步骤⑷获得的标准曲线即可计算出待测溶液中亚硝酸盐的浓度。