[发明专利]一种重组人源胶原蛋白生物海绵的制备方法

摘要

本发明公开了一种胶原蛋白生物海绵的制备方法，其包括将含壳聚糖的酸性溶液加入到含胶原蛋白的酸性溶液中，混合均匀后，注入模具，低温冷冻成型，对冷冻成型产物进行冷冻干燥，再浸泡入含原花青素的溶液中交联，洗涤后进行冷冻干燥，获得胶原蛋白生物海绵。本发明的生物海绵具有成形可控、不含杂质、适宜微孔结构、理化性能良好、生物相容性良好，无动物胶原海绵病毒隐患，且本发明的生物海绵质量稳定，成本低廉。

主权项

胶原蛋白生物海绵，其由如下方法制备：将重组人源胶原蛋白溶于3％(w/w)乙酸水溶液中，配制成5％(w/w)重组人源胶原蛋白溶液；将壳聚糖溶于3％(w/w)乙酸水溶液中，配制成5％(w/w)壳聚糖溶液；另外，将原花青素溶于含10％(v/v)无水乙醇的pH值为6磷酸盐缓冲液中，配制成0.5％(w/w)原花青素溶液；在冰浴条件下，将壳聚糖溶液滴入重组人源胶原蛋白溶液，期间搅拌，直至重组人源胶原蛋白与壳聚糖的质量比例为0.1:1时，继续搅拌240分钟，用真空脱泡机真空脱泡，然后将混合溶液注入模具中，在‑80℃温度下冷冻成型，再置于真空冷冻干燥机中冷冻干燥，形成初级生物海绵；然后，将初级生物海绵于25℃浸泡于原花青素溶液中交联48小时，而后用去离子水浸泡，期间换水多次，直至洗脱的水的pH达到6.8或以上，再次置于真空冷冻干燥机中冷冻干燥，获得重组人源胶原蛋白生物海绵。