[发明专利]高纯L‑α‑氨基酸的生物合成方法有效
申请号: | 201410552914.9 | 申请日: | 2014-10-17 |
公开(公告)号: | CN104313071B | 公开(公告)日: | 2018-04-13 |
发明(设计)人: | 许岗;曾红宇;帅得利;王胜锋 | 申请(专利权)人: | 湖南宝利士生物技术有限公司 |
主分类号: | C12P13/04 | 分类号: | C12P13/04 |
代理公司: | 长沙市融智专利事务所43114 | 代理人: | 魏娟 |
地址: | 410300 *** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | 本发明公开了一种高纯L‑α‑氨基酸的生物合成方法,该方法是在反应液中,醛类化合物和甘氨酸原料在L‑苏氨酸醛缩酶和L‑苏氨酸脱氨酶复合酶的催化作用下进行酶催化反应得到2‑酮酸产物;将所得2‑酮酸产物在由亮氨酸脱氢酶与甲酸脱氢酶或葡萄糖脱氢酶组成的辅酶催化下进行酶催化反应,反应产物依次经过电渗析脱盐、活性炭脱色、浓缩结晶、真空干燥处理,高产率得到高纯度L‑α‑氨基酸晶体;该方法以水相为反应体系,环保、廉价,设备要求低、酶可以反复使用,成本低,满足工业化生产。 | ||
搜索关键词: | 高纯 氨基酸 生物 合成 方法 | ||
【主权项】:
高纯L‑α‑氨基酸的生物合成方法,其特征在于,在反应液中,醛类化合物和甘氨酸原料在L‑苏氨酸醛缩酶和L‑苏氨酸脱氨酶复合酶的催化作用下,于pH为7.5±0.05,温度为30℃的条件下进行酶催化反应,反应产物通过层析分离后,得到2‑酮酸溶液;将所得2‑酮酸溶液调节pH到7.5~8.5后,加入由亮氨酸脱氢酶与甲酸脱氢酶或葡萄糖脱氢酶组成的辅酶,在20~40℃温度下进行酶催化反应,反应产物依次经过电渗析脱盐、活性炭脱色、浓缩结晶、真空干燥处理,得到L‑α‑氨基酸晶体;所述的L‑苏氨酸醛缩酶和L‑苏氨酸脱氨酶复合酶中L‑苏氨酸醛缩酶与L‑苏氨酸脱氨酶的总活力比为3: 2;所述的辅酶中亮氨酸脱氢酶与甲酸脱氢酶或葡萄糖脱氢酶的总活力比为1: 1.5~2.5;所述的醛类化合物具有式1结构:式1所述的2‑酮酸具有式2结构:式2所述的L‑α‑氨基酸具有式3结构:式3其中,R为C1~C4的直链烷烃基;酶催化反应所得反应产物通过电渗析脱盐后,维持温度在20~40℃范围内,加入活性炭进行吸附0.5~1.0h;其中,活性炭为木质活性炭,木质活性炭的使用量为2‑酮酸溶液体积的3.0~5.0‰;所述的电渗析脱盐过程中采用的极水为电导在5.0~10.0 ms/cm之间的硫酸钠溶液,浓水为去离子水,终止物料电导为8.0~10.0ms/cm;L‑苏氨酸醛缩酶在反应液中的加入量相对于醛类化合物为30000U/mol~50000U/mol,L‑苏氨酸脱氨酶在反应液中的加入量相对于醛类化合物为20000U/mol~ 40000U/mol。
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