[发明专利]一种马钱悬浮细胞培养的快速繁殖方法在审
| 申请号： | 201410540655.8 | 申请日： | 2014-10-14 |
| 公开（公告）号： | CN104221880A | 公开（公告）日： | 2014-12-24 |
| 发明（设计）人： | 刘东锋;杨成东 | 申请（专利权）人： | 南京帝道农业科技有限公司 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 211225 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明研究了一种马钱悬浮细胞培养的快速繁殖方法，包括无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的增值、悬浮细胞的培养等步骤，本发明方法所制备的马钱悬浮细胞品质优良，增值率高，短期内可以获得大量的悬浮细胞，为马钱药用成分的开发和利用提供技术支持。 | ||
| 搜索关键词： | 种马 悬浮 细胞培养 快速 繁殖 方法 | ||
【主权项】：
本发明研究了一种马钱悬浮细胞培养的快速繁殖方法，包括无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的增值、悬浮细胞的培养等，主要步骤如下：（1）取马钱幼嫩的叶片，按照常规的消毒方法对其进行消毒处理；（2）将步骤（1）消毒处理过的马钱叶片用强度为100‑300mT的均匀磁场预处理30min，接入培养基配方为BL+KT2mg/L+ZT2mg/l的培养基中进行愈伤组织诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照强度400lx，光照时间6h/d，温度24℃；（3）取步骤（2）诱导出来的愈伤组织放入培养基BL+NAA0.15mg/L+TDZ0.02mg/L+KT2mg/L进行愈伤组织增值培养，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照1000lx，光照时间10h/d，温度24℃；（4）取步骤（3）增值出来结构松散，颜色淡绿色的愈伤组织放入培养基MS+NAA0.1‑0.2mg/L+ZT1‑1.5mg/L+200‑350mg/L麦芽提取物中进行悬浮细胞培养，附加蔗糖45g/L，pH5.8，光照2500lx，光照时间12h/d，温度24℃。
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