[发明专利]大叶藻离体花序愈伤组织的诱导方法

摘要

本发明涉及一种大叶藻愈伤组织的诱导方法，是以大叶藻花序为外植体，将经过表面消毒的花序切成3‑5mm长接种到愈伤组织诱导培养基中进行愈伤组织的诱导，每半月转接一次，培养近1个月后花序轴两侧膨大，逐渐形成愈伤组织；所述愈伤组织培养基是以改良MS培养基为基础培养基，并添加2,4‑D、水解酪蛋白、蔗糖、琼脂和海盐。本发明采用改良的MS培养基，可有效地促进大叶藻愈伤组织的诱导，为大叶藻组培再生苗的产生和快速繁殖的实现提供重要的技术支撑。

主权项

一种大叶藻愈伤组织的诱导方法，其特征在于，是以大叶藻的花序为诱导愈伤组织的外植体；由以下步骤组成：1)外植体的选取：采集大叶藻花枝，取其健康佛焰苞花序，经表面除杂、清洗后在超净工作台内进行消毒处理，剥去佛焰苞花序外的苞叶，得到无菌的花序；2)愈伤组织的诱导培养：在无菌条件下将无菌花序切成3‑5mm长的外植体片段，接种于诱导培养基中，于15‑25℃、黑暗条件下进行培养；其中，所述诱导培养基是以改良MS培养基为基础培养基，并添加水解酪蛋白100mg/L、蔗糖30g/L、2,4‑D 2mg/L、琼脂5g/L、海盐20g/L；培养30‑40d后可见到花序两侧组织膨大，产生愈伤组织；所述改良MS培养基是以MS培养基为基础，在其它成分不变的情况下调整其中的硝酸钾为0‑3800mg/L、硝酸铵为0‑3300mg/L、磷酸二氢钾为0‑340mg/L、七水硫酸镁0‑740mg/L、二水氯化钙0‑880mg/L。