[发明专利]检测凝血酶用生物电化学传感器其制备方法及应用有效
| 申请号： | 201410462190.9 | 申请日： | 2014-09-11 |
| 公开（公告）号： | CN104267192A | 公开（公告）日： | 2015-01-07 |
| 发明（设计）人： | 李根喜;赵婧;吴吉光;仲卫冬;辛美玲 | 申请（专利权）人： | 上海大学 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68 |
| 代理公司： | 上海上大专利事务所(普通合伙) 31205 | 代理人： | 陆聪明 |
| 地址： | 200444*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种检测凝血酶用生物电化学传感器其制备方法及应用。该传感器为三电极体系传感器，其中对电极为铂电极，参比电极为饱和甘汞电极，工作电极为功能化修饰的热解石墨电极，该功能化修饰的热解石墨电极是在热解石墨电极表面依次修饰有聚（二烯丙基二甲基氯化铵）、金纳米颗粒、葫芦[7]脲和循环混合液；所述的循环混合液中含有：100nMMB标记的探针DNA链、1nM延伸DNA链、1nM的凝血酶适体链、1.6unit/μL的T4DNA连接酶和0.4unit/μL的ExoIII。本发明利用凝血酶与适体的特异性结合能力，同时，借助连接酶辅助作用引发ExoIII的循环切割反应，并结合电化学快速灵敏的检测优势实现对凝血酶的高灵敏性检测。 | ||
| 搜索关键词： | 检测 凝血酶 生物 电化学传感器 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种检测凝血酶用生物电化学适体传感器，为三电极体系传感器，其中对电极是铂电极，参比电极是饱和甘汞电极，工作电极为功能化的热解石墨电极，其特征在于所述的功能化的热解石墨电极是在热解石墨电极表面依次修饰有聚（二烯丙基二甲基氯化铵）、金纳米颗粒、葫芦[7]脲和循环混合液；所述的循环混合液中含有：100 nM MB标记的探针DNA链、1 nM延伸DNA链、1 nM的凝血酶适体链、1.6 unit/μL的T4 DNA连接酶和0.4 unit/μL的Exo III；所述的凝血酶适体链为：5’‑GAGGTTGGTGTGGTTGG‑3’；所述的延伸DNA链为：5’‑ATATCGCT‑3’；所述的MB标记的探针DNA链为：5’‑AAAAAACCAACCTCAGCGATAT‑ Methylene Blue (MB) ‑3’。
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