[发明专利]一种快速提取和纯化福尔马林固定组织中DNA的方法在审
申请号: | 201410383891.3 | 申请日: | 2014-08-06 |
公开(公告)号: | CN104328108A | 公开(公告)日: | 2015-02-04 |
发明(设计)人: | 翟仙敦;莫耀南;秦豪杰;张振芳;薛小琦;赵贵森;艾红伟 | 申请(专利权)人: | 河南科技大学 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 郑州睿信知识产权代理有限公司 41119 | 代理人: | 牛爱周 |
地址: | 471003 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | 本发明公开了一种快速提取和纯化福尔马林固定组织中DNA的方法,属于法医学技术领域。该方法包括以下步骤:(1)取福尔马林固定组织,蒸馏水冲洗后破碎组织,用滤纸吸干;(2)加入无水乙醇浸泡1~5分钟,离心,弃去上清;再依次加入浓度70~80%的乙醇和浓度40~60%的乙醇,重复以上步骤,最后留取沉淀;(3)加入细胞裂解液、十二烷基磺酸钠和蛋白酶K,在温度55~65℃下孵化处理,离心,取上清液;(4)在上清液中加入盐,混匀,在温度-4~4℃下静置分层,离心,取上清液;(5)在上清液中加入DNA结合液,混匀,转移到固定有二氧化硅膜的套管内,离心,弃去液体,洗脱DNA,即得。该方法简便易行、无毒副作用,易于推广。 | ||
搜索关键词: | 一种 快速 提取 纯化 福尔马林 固定 组织 dna 方法 | ||
【主权项】:
一种快速提取和纯化福尔马林固定组织中DNA的方法,其特征在于:包括以下步骤:(1)取福尔马林固定组织,蒸馏水冲洗后破碎组织,用滤纸吸干;(2)在步骤(1)的组织中加入无水乙醇浸泡1~5分钟,离心,弃去上清;再依次加入浓度70~80%的乙醇和浓度40~60%的乙醇,重复以上步骤,最后留取沉淀;(3)在步骤(2)留取的沉淀中加入细胞裂解液、十二烷基磺酸钠和蛋白酶K,在温度55~65℃下孵化处理,离心,取上清液;(4)在步骤(3)的上清液中加入盐,混匀,在温度‑4~4℃下静置分层,离心,取上清液;(5)在步骤(4)的上清液中加入DNA结合液,混匀,转移到固定有二氧化硅膜的套管内,离心,弃去液体,洗脱DNA,即得。
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