[发明专利]一种便捷观察兰科植物菌根显微结构的方法

摘要

一种便捷观察兰科植物菌根显微结构的方法，包括一个准备根段材料、固定液、解离液以及染色液的步骤，一个对根段进行固定的步骤，将兰科植物根段完全浸没在固定液中，一个对根段进行切片的步骤，将根段切成薄片移入盛有清水的容器中备用，一个对根部材料进行解离的步骤，将根部材料浸没在KOH溶液中解离，一个对根部材料进行染色的步骤，将解离好的根部材料放入锥虫蓝溶液中染色，一个对根部材料进行压片、封片的步骤，然后放在光学显微镜下进行镜检。本发明可以清晰观察到视野中细胞内是否被菌根真菌侵染，通过统计视野内被侵染的细胞展视野内总细胞的比例，检测兰根是否被侵染以及被侵染的程度，为研究兰花共生生长提供基础数据。

主权项

一种便捷观察兰科植物菌根显微结构的方法，其特征在于包含下列步骤：1）一个准备根段材料、固定液、解离液以及染色液的步骤，所述的根段材料为新鲜的兰科植物根段，在所述的兰科植物根段中，根段长度在1～10cm之间，所述的固定液是FAA固定液，所述的解离液是质量百分比浓度为5%～10%的碱溶液，所述的染色液为锥虫兰溶液； 2）一个对根段进行固定的步骤，将兰科植物根段完全浸没在FAA固定液中，至少固定24h；3）一个对根段进行切片的步骤，将根段切成复数个薄片，所述的薄片的厚度在0.1~1cm之间，将根段切片移入盛有清水的容器中备用；4）一个对根段切片进行解离的步骤，将根段切片放入解离液中解离，解离时间为5～60min，解离温度为80~95℃； 5）一个对根段切片进行染色的步骤，解离后，将解离好的根段切片在去离子水中冲洗2～3次后，再放入锥虫蓝溶液中染色，染色的时间为6～24h； 6）一个对根段切片进行压片、封片的步骤，将染色好的根段切片平放在载玻片上，滴上甘油，盖上盖玻片，用滤纸轻压后，放在光学显微镜下进行镜检。