[发明专利]一种大鼠心肌细胞的培养方法

摘要

本发明公开了一种大鼠心肌细胞的培养方法，其包括步骤：(1)将大鼠心肌组织浸于消化酶混合液中进行分次消化至心肌组织松软后弃去消化液，然后加入DMEM培养基，吹打松软的心肌组织，取上清进行离心收获细胞沉淀；(2)以DMEM培养基重悬细胞沉淀，将细胞悬液过180～220目筛后转移至培养瓶中进行差速贴壁2～3次，每次40～50分钟；(3)将心肌细胞以1.5～2.5×105个/mL的密度接种于培养容器中，接种后将培养容器置于培养箱中培养。本发明的方法成本低、耗时短、程序简化且不使用青霉素和Brdu等药物，从而能够避免青霉素和Brdu对后续研究的潜在影响。

主权项

一种大鼠心肌细胞的培养方法，其特征在于，其包括如下步骤：(1)将大鼠心肌组织浸于消化酶混合液中进行分次消化至心肌组织松软后弃去消化液，然后加入DMEM培养基，吹打松软的心肌组织，取上清进行离心收获细胞沉淀，所述的消化酶混合液包括0.7～1.0g/L胰蛋白酶和0.5～0.8g/L II型胶原酶；(2)以DMEM培养基重悬步骤(1)所得的细胞沉淀，将细胞悬液过180～220目筛后转移至培养瓶中进行差速贴壁2～3次，每次40～50分钟；(3)取差速贴壁后培养瓶中的细胞悬液，将心肌细胞以1.5～2.5×105个/mL的密度接种于培养容器中，接种后将培养容器置于培养箱中培养；其中，步骤(1)和(2)中所述的DMEM培养基为含8～12％FBS的DMEM培养基，所述的百分比为体积百分比。