[发明专利]用于膜蛋白在线鉴定的膜蛋白富集、纯化、酶解一体化装置及使用方法

摘要

本发明属于生物分析与检测技术领域，具体为一种用于膜蛋白线鉴定的膜蛋白富集、纯化、酶解一体化装置。该装置由高压泵、六通阀、膜蛋白共价固定反应柱及有关连接组成。所述膜蛋白固定反应柱中填料表面的活性基团能够与膜蛋白游离氨基、羧基发生反应，从而将膜蛋白牢牢固定在反应柱上。本发明利用共价键合的原理将膜蛋白固定在反应柱内，增溶剂以及磷脂等干扰物可通过流动相在线冲洗的方法除去，不会造成额外的样品损失，从而达到理想的鉴定效果。实验表明，利用本发明装置具有反应效率高、非特异性吸附小等优点，并成功运用到大鼠鼠肝组织膜蛋白组的鉴定中。本发明装置结构新颖，实用高效，具有推广应用潜力。

主权项

 用于膜蛋白线鉴定的膜蛋白富集、纯化、酶解一体化装置，其特征在于由一个四元高压泵、一个进样针、一个进样环、一个六通阀、一个膜蛋白共价固定的反应柱、一个十通阀和一个捕集柱组成；其中，六通阀具有6个接口，四元高压泵与六通阀的2号口相连，六通阀的5号口为进样口，进样环连接于六通阀的1号口和4号口之间，反应柱连接于六通阀的3号口与十通阀的1号口之间，捕集柱连接于十通阀的2号口与6号口之间，六通阀的5号口与十通阀的5号口连接废液瓶；所述四元高压泵具有A、B、C、D共4个相位，分别对应于A、B、C、D 4个相，A相为反应缓冲液，B相为Tris‑HCl 和 0NaCl 的混合溶液，C相为NH₄CO₃溶液，D 相为去离子水。