[发明专利]一种叶绿体色素纸层析分离方法

摘要

一种叶绿体色素纸层析分离方法，涉及一种色素纸层析分离方法，首先制备色素提取液，于避光处保存备用。然后，制作圆柱滤纸。最后，进行点样，将点样色素用电吹风吹干后，在其中央制一小孔，把圆柱滤纸一端插入其中，另一端即底座端置于装有展层剂的培养皿内，将点样的圆形滤纸置于培养皿上，此时层析开始进行。待四条色带（胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a和叶绿素b）均分离出即可。该方法在提高层析分离效果，如色带颜色纯正、色带边缘清晰的同时，降低层析容器投资（节省投资60%），减少层析滤纸处理繁琐以及丙酮做提取剂、四氯化碳做展层剂所产生的毒性污染。该分离方法分离效果好，省时省力而且减少环境污染和毒性。

主权项

一种叶绿体色素纸层析分离方法，其特征在于，所述方法包括以下过程：a.提取色素：将洗净的新鲜植物叶片去除粗大叶脉，剪成碎块，放入研钵中，加入提取剂和碳酸钙，研磨成匀浆后再加入提取剂，然后用过滤，过滤后的残渣再用提取剂洗涤数次，直至洗涤残渣后过滤出的提取剂无色为止，上述多次用提取剂洗涤植物叶片残渣后过滤出的液体即色素提取液，放暗处备用； b.制作圆柱滤纸：剪一张长方形滤纸，将滤纸长边一侧剪成许多窗帘状细条，把长方形滤纸卷成一根小圆柱，长方形滤纸中的窗帘状细条置于一端，并将窗帘状细条向外散开，形成底座，上述由上部为圆柱和下部为窗帘状细条构成的滤纸称为圆柱滤纸；c、分离色素：取一张圆形滤纸，用滴管吸取植物色素提取液小心滴在滤纸的中央，滴两到三滴，将其用电吹风吹干备用；用滴管吸取植物色素提取液滴在滤纸的中央的动作称为点样；将石油醚—丙酮展层剂倒入培养皿，铺满皿底；d.点样干燥后的圆形滤纸，在其色素的中央制一个小孔，将做好的圆柱滤纸的上端插入其中，圆柱滤纸底座即窗帘状细条浸入培养皿中的展层剂，点样的圆形滤纸放在培养皿上，层析即开始进行；培养皿中的展层剂沿着圆柱滤纸向上扩散，当展层剂扩散到圆形滤纸中的点样色素时，展层剂便在圆形滤纸上扩散，点样色素随展层剂的扩散得以分离；当展层剂扩散到圆形滤纸边缘附近时，点样色素全部分开，在圆形滤纸上形成四条同心圆形的色素带，至此层析结束。