[发明专利]不对称还原前手性羰基化合物生产手性醇的方法

摘要

本发明公开了一种不对称还原前手性羰基化合物生产手性醇的方法，解决了现有方法存在的催化反应速度低，对底物范围窄，时空产率低和立体选择性不高的问题。催化用菌株的保藏名称为微杆菌(Microbacterium sp.long2)，保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC NoM2011449，所述手性醇的生产方法为发酵大规模培养所述的微杆菌，得到活性静息细胞菌体；然后制成菌悬液，加入底物进行催化反应，催化反应结束后萃取反应产物，回收溶剂，获得产物。本发明方法工艺简单、反应条件和时间温和，生产周期短、立体选择性高，反应转化率高，具有很好的工业应用前景。

主权项

一种不对称还原前手性羰基化合物生产手性醇的方法，其特征在于，按以下步骤进行：(1)发酵大规模培养微杆菌，在对数生长期后期离心收集湿菌体获得活性静息细胞菌体，冷冻保藏；所述发酵大规模培养微杆菌的方法为：a.将斜面上生长良好的所述菌株用接种针挑取少许接种于种子培养基中，30～37℃，150～300r/min摇床培养24～48h后作为种子；b.再以1％～5％的接种量接种到发酵培养基中大量培养细胞，培养条件为：无菌空气0.5～1vvm‑1通气率，150～350r/min，培养24～48h，离心并收集湿菌体，得静息细胞；其中，种子培养基组成比例为：葡萄糖10g，酵母提取物5g，蛋白胨5g，MgSO4.7H2O 0.5g，蒸馏水1000mL，pH 7.0；发酵培养基比例为：葡萄糖10‑20g，酵母提取物1‑10g，蛋白胨1‑10g，异丙醇5‑100mg，作为反应底物的前手性羰基化合物5‑500mg，FeSO4 0.1g，MgSO4.7H2O 0.5g，(NH4)2SO4 2g，水1000mL，pH 7.0，30～37℃；(2)将静息细胞菌体悬于pH缓冲液中制成菌悬液，加入底物、辅助底物与表面活性剂进行催化反应，生成单一手性的手性醇，所述底物为前手性羰基化合物，所述辅助底物为甘油，添加量为1～20g/L；所述表面活性剂为生物相容性表面活性剂，添加量占催化反应体系总体积的0.01％‑0.1％；(3)催化反应结束后利用非极性易挥发溶剂萃取反应产物，利用减压蒸发回收萃取剂，获得产物；所述微杆菌为一种能够高效不对称还原前手性芳香酮的菌株，保藏名称为：微杆菌(Microbacterium sp.long2)，保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为：CCTCC No:M2011449。