[发明专利]一种肿瘤标志物AFP磁微粒化学发光免疫分析试剂盒及其检测方法

摘要

本发明涉及一种肿瘤标志物甲胎蛋白（AFP）的磁微粒化学发光免疫检测试剂盒及其检测方法，属于免疫检测分析技术领域。异硫氰酸荧光素（FITC）标记的AFP单克隆抗体和碱性磷酸酶（AP）标记的单克隆抗体与抗原结合，形成FITC标记抗体-抗原-AP标记抗体的夹心免疫复合物，类似“三明治”结构。随后加入连有抗FITC抗体的磁性微粒，通过抗FITC抗体与FITC的特异性结合使抗原抗体复合物连接在磁颗粒上，在外加磁场中直接沉淀，不需离心即可将免疫反应形成的复合物与未结合的其它物质分离。本发明试剂盒将化学发光与磁微粒相结合，提供了一种接近均相的反应体系，与现有技术相比，本发明试剂盒具有更高的灵敏度、线性范围宽、快速等诸多优点，并且大大降低了产品成本，在临床检验等方面具有广阔的应用前景。

主权项

一种肿瘤标志物AFP磁微粒化学发光免疫分析试剂盒及其检测方法，其特征在于：将羊抗FITC抗体与直径为0.1‑5微米的磁微粒连接组成固相试剂，经捕捉反应体系中的FITC标记抗体、抗原以及酶标记抗体后形成固相‑FITC标记抗体‑抗原‑酶标记抗体夹心复合物；所述的酶标记抗体中使用的酶是碱性磷酸酶AP；所述的酶标试剂的偶联方法是将N‑琥珀酰胺3‑（2‑吡啶二巯基）丙酸SPDP活化的抗体与Traunt’s试剂活化的碱性磷酸酶以1:0.5‑2的比例混合，并用凝胶层析柱分离纯化；所使用的底物溶液为环二氧乙烷类衍生物AMPPD。