[发明专利]一种接多肽壳聚糖/羟基磷灰石/珍珠粉支架的制备方法

摘要

本发明涉及一种接多肽壳聚糖/羟基磷灰石/珍珠粉支架的制备方法，属于医用材料技术领域。首先将壳聚糖溶于醋酸水溶液中，再将2-亚氨基硫烷盐酸盐溶于其中，调pH值，透析，冻干，得到巯基化壳聚糖；将骨形态发生蛋白-2多肽溶于二甲基亚砜中，加入到巯基化壳聚糖水溶液中，得到接多肽壳聚糖；最后将到接多肽壳聚糖溶于盐酸中，加入珍珠粉和羟基磷灰石粉，填充于圆柱型模具中，冷冻干燥，得到接多肽壳聚糖/羟基磷灰石/珍珠粉支架。本发明方法的优点是将BMP-2多肽通过化学方法接枝到壳聚糖上。该支架材料除了具备良好的骨传导性，降解性，细胞粘附性外，由于多肽和珍珠粉有机基质的存在同时具备成骨诱导性，可用于骨缺损修复。

主权项

一种接多肽壳聚糖/羟基磷灰石/珍珠粉支架的制备方法，其特征在于该制备方法包括以下步骤：(1)将壳聚糖溶于体积浓度为1％的醋酸水溶液中，壳聚糖与醋酸水溶液的质量体积比浓度为1～2mg/mL，得到壳聚糖的醋酸溶液；(2)将2‑亚氨基硫烷盐酸盐溶于上述步骤(1)得到的壳聚糖醋酸溶液，完全溶解后成为混合液，用NaOH溶液调节混合液的pH值为4～6，连续搅拌24～30小时；(3)将步骤(2)得到的混合液置于截留分子量为8000～14000的透析袋中，透析4～6天，将透析袋中的产物记为透析产物；(4)将步骤(3)得到的透析产物在‑20℃预冻24～30小时，在真空冻干机中冷冻干燥70～80小时，得到巯基化壳聚糖；(5)将步骤(4)得到的巯基化壳聚糖溶于去离子水溶液中，得到质量体积比浓度为5～10mg/ml的巯基化壳聚糖的水溶液；(6)将骨形态发生蛋白‑2多肽加入到有机溶剂二甲基亚砜中，得到质量体积比浓度为1～2mg/mL的多肽溶液；(7)将步骤(6)得到的多肽溶液加入到步骤(5)的巯基化壳聚糖水溶液中，加入的体积比为：多肽溶液:巯基化壳聚糖水溶液＝1:(3～5)，连续搅拌3～5小时，得到混合溶液；(8)将步骤(7)得到的混合溶液置于截留分子量为8000～14000的透析袋中，透析4～6天，将透析袋中的产物记为透析产物；(9)将步骤(8)得到的透析产物在‑20℃预冻24～30小时，在真空冻干机中冷冻干燥50～60小时，得到接多肽壳聚糖；(10)将步骤(9)得到的接枝接多肽壳聚糖溶解于摩尔浓度为0.1M的盐酸中，得到质量体积比浓度为10～20mg/mL的接枝接多肽壳聚糖溶液；(11)将珍珠粉和羟基磷灰石粉按质量比为1:(1～2)的比例加入到步骤(10)得到的接枝接多肽壳聚糖溶液中，加入的质量比为：珍珠粉和羟基磷灰石粉:接枝接多肽壳聚糖＝1:(2～1)，搅拌均匀，成为混合物；(12)将步骤(11)得到的混合物填充于圆柱型模具中，在‑20℃预冻24～30小时，在真空冻干机中冷冻干燥20～30小时，得到接多肽壳聚糖/羟基磷灰石/珍珠粉支架。