[发明专利]一种柳枝稷突变体的创制方法

摘要

本发明公开了一种柳枝稷突变体的创制方法，用组织培养的方式培养出大量柳枝稷丛生芽后，剥离出单个丛生芽，在自然条件下炼苗后切除上部叶鞘，用甲基磺酸乙酯(EMS)溶液对剩余的基部以上1.5～2cm部分进行浸泡处理3h，完成后直接将切除叶鞘的丛生芽移栽到培养基质中进行培养，生根完成后移栽至温室或者大田，根据柳枝稷表型筛选出突变体。该方法能规模化处理突变的原始受体材料，增加了变异株的基数，同时能获得与原始受体材料仅目标性状差异的近等基因系材料，而且诱变过程简单易行，处理成本相对比较低廉，能有效缩短育种周期，适合为柳枝稷现代生物技术研究创制新材料。

主权项

1.一种柳枝稷突变体的创制方法，其特征在于，包括以下操作：1)大田情况下，当柳枝稷植株生长发育达到5～6个节、幼穗开始形成时，取长度1～1.5cm的穗下茎节组织；对穗下茎节组织消毒处理后冲洗，然后接种至MBP培养基，扩充丛生芽群体；其中所述MBP培养基的成分为：MS基本培养基4.43g/L，蔗糖30g/L，6‑BA(6‑苄基腺嘌呤)3mg/L，琼脂7.5g/L，pH＝5.8；2)挑选生长健壮的丛生芽，在不损伤基部的生长点的情况下剥离丛生芽，获取待诱变的丛生芽群体；将丛生芽群体在25℃室温条件下炼苗24～36h，然后切除上部叶鞘，预留基部以上1.5～2cm，并喷水保持其湿润；3)以磷酸缓冲液配制的质量浓度为0.5～1.0％的甲基磺酸乙酯溶液作为诱变液，将诱变液与待诱变的丛生芽群体充分混合后，在真空环境下静置1～3h进行诱变；4)将诱变后的丛生芽群体用水充分冲洗后，插入培养基质中栽植，栽植深度为0.5～1cm，栽植完成后温室培养；5)温室培养三个月后，将长成的单株移栽至大田中；6)在大田环境中，以初始基因型性状作为对照，根据诱变后植株表型性状和生理性状变化，鉴定出柳枝稷突变体。