[发明专利]蕨类植物绿色球状体60Co r射线辐射诱变方法

摘要

本发明涉及蕨类植物绿色球状体⁶⁰Co r射线辐射诱变方法，属于植物培养方法技术领域。在离体培养条件下，以蕨类植物无菌苗诱导产生的绿色球状体为材料，⁶⁰Co r射线为辐射源。辐射处理的绿色球状体转到附加吲哚丁酸IBA0.2mg/L的成苗培养基上萌发，形成具有根、茎、叶的完整小植株。⁶⁰Co r射线剂量率为1Gy/min，辐照剂量为80Gy，扇蕨的绿色球状体成苗率为38%，凤尾蕨的绿色球状体成苗率为26%。本发明建立的蕨类植物绿色球状体⁶⁰Co r射线辐射诱变方法，为在器官水平上开展蕨类植物辐射诱变育种提供新技术，适用于蕨类植物新品种选育。

主权项

蕨类植物绿色球状体⁶⁰Co r射线辐射诱变方法，其特征在于：1） 材料以蕨类植物无菌苗诱导产生的绿色球状体为辐射处理材料，⁶⁰Co r射线为辐射源；2） 培养基基本培养基由MS大量元素、MS微量元素与B₅维生素组成，添加蔗糖30 g/L，琼脂条 8 g/L；绿色球状体诱导和增殖培养基：附加6‑苄基氨基嘌呤0.5 mg/L和吲哚丁酸IBA 0.1 mg/L；绿色球状体成苗培养基：附加吲哚丁酸IBA 0.2 mg/L，活性炭质量比 0.1%；上述培养基在高压灭菌前用氢氧化钠和盐酸调整pH值至5.8；3） 方法将1）扇蕨和凤尾蕨无菌苗接种到2）诱导培养基上，在无菌苗基部诱导产生绿色球状体；绿色球状体在2）增殖培养基上进行增殖培养后进行辐射处理, ⁶⁰Co r射线的辐照剂量是80 Gy或100 ~ 120 Gy；经过辐射诱变处理的绿色球状体转移到2）成苗培养基上，在光照条件下培养，30 d左右萌发产生绿芽；绿芽转移到2）新鲜的成苗培养基上，30 d左右形成具有根、茎、叶的完整小植株；离体培养条件：培养室温度为26±2⁰C，光照强度为1500 lx，光照时间为12 h/d；绿色球状体增殖和成苗培养均在光照条件下进行。