[发明专利]一种6-O-羧甲基壳聚糖硫酸酯化产物的合成方法

摘要

本发明公开了一种6-O-羧甲基壳聚糖硫酸酯化产物的合成方法，包含如下步骤：(1)甲壳素碱化处理；(2)甲壳素C₆-O位羧甲基化；(3)6-O-羧甲基甲壳素的脱乙酰反应；(4)6-O-羧甲基壳聚糖的硫酸酯化。本发明的合成方法是一种运用甲壳素选择性取代、控制取代率的全新方法，该方法的合成产物不仅提供主要抗凝血活性的N位-SO₃H，且引入-COOH使分子结构上大量带负电的-COOH和-SO₃H有规则地分布，协同作用产生类肝素的抗凝血效应。此高分子多糖是由甲壳素经安全试剂选择改性的类肝素药物，减少了原料药试剂污染，更避免肝素生物体提取的病毒污染风险，理论上，其临床实验的药物安全性能较肝素钠更优异，有希望作为廉价的直接凝血酶抑制剂，替代肝素钠抗凝血药物。

主权项

一种6‑O‑羧甲基壳聚糖硫酸酯化产物的合成方法，其特征在于，包含如下步骤：(1)甲壳素碱化处理将甲壳素与20wt％‑60wt％的NaOH水溶液按甲壳素与NaOH的摩尔比为1:5～1:10的比例混合，在20‑25℃搅拌分散，真空负压1‑5小时待NaOH水溶液渗透完全，在‑20～0℃冰冻12‑48小时；(2)甲壳素C₆‑O位羧甲基化将经步骤(1)碱化处理后的甲壳素加入分散剂中搅拌至完全分散，分散剂的体积与甲壳素的质量比为10～20ml：1g，缓慢加入氯乙酸，在10min～1小时内加完，氯乙酸与甲壳素的质量比为0.47～2.33g：1g，在25‑65℃下反应2‑24小时；反应结束后过滤除去分散剂，将滤渣溶于去离子水中调节pH值为5～9，用分子量截留值为10,000的超滤膜超滤纯化，最后经干燥得到6‑O‑羧甲基甲壳素；(3)6‑O‑羧甲基甲壳素的脱乙酰反应将6‑O‑CMCH分散于分散剂中，分散剂的体积与6‑O‑羧甲基甲壳素的质量比为10～40ml：1g，加入20wt％‑60wt％的NaOH水溶液，NaOH与6‑O‑羧甲基甲壳素的一个重复单元摩尔比为1～15：1，然后在50‑100℃下搅拌反应2‑8小时，反应结束后过滤除去分散剂，滤渣溶于去离子水中后调节体系pH值为5～9，用分子量截留值为10,000的超滤膜超滤纯化，经干燥得到6‑O‑羧甲基壳聚糖；(4)6‑O‑羧甲基壳聚糖的硫酸酯化将6‑O‑羧甲基壳聚糖分散于分散剂中，分散剂的体积与6‑O‑羧甲基壳聚糖质量比为10～20ml：1g，在0‑10℃下搅拌0.5‑2小时，然后加入氯磺酸和浓硫酸的混合酸液，氯磺酸与浓硫酸的体积比为2：1，混合酸液的体积与6‑O‑羧甲基壳聚糖质量比为5～15ml：1g，在0‑65℃下恒温搅拌反应2‑16小时，反应结束后用2‑10wt％的NaOH水溶液中和，加入乙醚，在0‑4℃下冷藏12‑48h，倾去上层清液以去除游离的SO₄^2‑离子，然后加入有机溶剂沉淀出固体，过滤除去有机溶剂，滤渣溶于去离子水中后用分子量截留值为10,000的超滤膜超滤纯化，最后经干燥得到6‑O‑羧甲基壳聚糖硫酸酯化产物。