[发明专利]色素相关基因作为直观标记的花粉介导植物转基因方法

摘要

一种色素相关基因作为直观标记的花粉介导植物转基因方法，目的是根据转化处理种子颜色变化直观地对转化种子进行选择，简化筛选步骤，缩短获得转化子的周期；本发明方法以携带色素相关外源基因及其启动子的农杆菌Ti质粒、大肠杆菌质粒或其它DNA载体为基因供体，以植物的雄配子体花粉为受体，在经过通气和低温处理的0.15‑1.5 mol的蔗糖溶液中使花粉与DNA片段混合，通过超声波辅助对花粉悬浮液的作用使外源基因转移到受体花粉中；然后将处理花粉授到植物柱头上，并在籽粒成熟时予以收获；在随后的生长季根据种子颜色变化对转化处理后收获的种子进行初步选择，使种子发芽，并对成苗株样本DNA进行PCR扩增及Southern杂交等分子检测验证，进一步确定转化株。

主权项

一种花青素基因作为直观标记的花粉介导植物转基因方法，其特征是以携带花青素相关外源基因及其启动子的农杆菌Ti质粒、大肠杆菌质粒或其它DNA载体为基因供体，以植物的雄配子体花粉为受体，在经过通气和低温处理的0.15‑1.5 mol的蔗糖溶液中使花粉与DNA片段混合，通过超声波辅助对花粉悬浮液的作用使花青素相关外源基因转移到受体花粉中；然后将处理花粉授到植物柱头上，并在籽粒成熟时予以收获；在随后的生长季根据种子颜色变化对转化处理后收获的种子进行初步选择，然后使种子发芽，并对成苗株样本DNA进行PCR扩增及Southern杂交分子检测验证，进一步确定转化株。