[发明专利]一种组织工程学修复神经缺损的方法

摘要

本发明属于细胞生物学领域，涉及组织工程学修复神经缺损的方法，具体涉及一种采用脂肪来源的许旺细胞修复人工周围神经缺损的方法及其应用。本发明利用从废弃的脂肪组织中获得的许旺细胞修复损伤的神经以及应用大量脂肪来源的许旺细胞和少量的脂肪干细胞共同修复神经缺损，经动物实验证实，能有效的促进损伤神经的再生。本方法提供了一种组织工程学中修复神经缺损的新方法，为损伤神经的修复提供了一种更优质的治疗参考方法。具有临床应用前景和临床价值。

主权项

脂肪来源许旺细胞作为神经种子细胞在制备组织工程再生神经中的用途；其中，脂肪来源许旺细胞通过下述方法提取：1)无菌剥离离体的脂肪组织，用10‑15ml 0.2％NB4和5‑10ml 0.2％Dispase酶溶液消化脂肪组织碎块45～90分钟，将溶解的组织1500rpm，离心5分钟，弃上清，得到细胞团块；2)用许旺细胞培养液重悬步骤1)得到的细胞，以1x104‑5x104个/cm2接种于培养皿；3)上述细胞培养48‑72小时，用0.2％Dispase酶纯化细胞，收集细胞混悬液，以600g离心5‑10分钟，弃去上清；4)用许旺细胞培养液重悬步骤3)得到的细胞，培养48‑72小时得到大量许旺细胞；5)采用0.25％胰酶消化上述许旺细胞，消化1分钟，DMEM中和胰酶，收集细胞悬液，离心；6)随后将细胞重悬浮于许旺细胞培养液(SCCM)和Matrigel胶的混合液，SCCM和Matrigel胶按1:1比例制成混合液。