[发明专利]一种单克隆抗体的生物学活性测定方法

摘要

本发明公开了一种重组抗人表皮生长因子受体单克隆抗体的生物学活性测定方法。将人肺癌淋巴结转移细胞H292细胞与不同浓度的抗EGFR单抗孵育，加入细胞计数染色试剂CCK-8，用酶标读数仪测定活细胞染色的吸光值，试验数据采用计算机程序处理，计算抗EGFR样品相对于抗EGFR标准品的生物学活性。本发明所采用的检测细胞H292细胞株对于不同亲和力的抗体均适用，细胞培养时间短，需要的细胞数量较少；而且本发明改进了MTT比色法的染色液，改用CCK-8染色液，产物的溶解度较好，不需要进一步的溶解处理，加入染色液后可以在不同的时间检测结果，显色结果稳定，质量更可控。该方法测定的生物学活性与临床疗效相关，符合FDA相关的技术要求。

主权项

一种重组抗人表皮生长因子受体单克隆抗体的生物学活性测定方法，其特征在于，该方法包含如下步骤：（1）制备特定肿瘤细胞悬液；所述特定肿瘤细胞的细胞膜过度表达表皮生长因子受体；（2）制备不同浓度的重组抗人表皮生长因子受体的单克隆抗体溶液；（3）特定肿瘤细胞与不同浓度的重组抗人表皮生长因子受体的单抗孵育68‑72小时，加入细胞计数染色试剂CCK‑8震荡混匀，37℃温育2‑4小时；（4）在酶标仪上以630nm为参比波长，于波长450nm处测定吸光度，通过数据处理计算抗EGFR样品相对于抗EGFR标准品的生物学活性。