[发明专利]一种促进马尾松组培继代芽生根方法

摘要

本发明公开了一种促进马尾松组培继代芽生根方法，选用生长健壮、半木质化及苗高2-3cm的马尾松组培继代芽，采用不同的培养基以两步生根法，先接种在含有吲哚乙酸、吲哚丁酸、蔗糖的1/2改良MS培养基Ⅳ中，诱导处理不定根原基21-28d；然后转接至没有生长素，而是含有活性炭或抗坏血酸、蔗糖的1/2改良MS培养基Ⅴ中，促进不定根的表达与伸长；将已生根的再生植株移栽于黄泥土或泥炭土、蛭石、珍珠岩混合基质中培育极大地促进和改善了继代芽生根情况，马尾松继代芽生根率达93.1%以上，最高生根率达97.6%，且根系质量较高，移栽成活率达85.1%以上，最高成活率达93.0%，具有较好的经济效益和社会效益。

主权项

一种促进马尾松组培继代芽生根方法，其特征在于：包括丛芽诱导、丛芽伸长、继代培养、不定根诱导、不定根伸长、试管苗移栽的两步生根法，获得马尾松组培继代芽生根苗，其操作步骤如下：丛芽诱导：将马尾松种子消毒后，在无菌条件下进行种子萌发，然后截取带0.5 cm长下胚轴的无菌苗顶芽为外植体，在诱导培养基Ⅰ中进行丛芽诱导；丛芽伸长：将诱导出的丛生芽在伸长培养基Ⅱ中进行伸长培养；继代培养：将单个切下伸长芽的顶芽接种到继代增殖培养基Ⅲ中进行增殖，获得继代芽Ⅰ；将继代芽Ⅰ重复步骤（2）进行伸长，单个切下伸长的继代芽Ⅰ并分成顶芽和带侧芽芽段，然后在步骤（3）继代增殖培养基中继续增殖获得继代芽Ⅱ，将继代芽Ⅱ再重复步骤（2）和步骤（3），获得新的增殖继代芽；重复循环步骤（2）和（3），直至获得大量足够生根培养继代芽；不定根诱导：单个切下生长健壮、半木质化、高2‑3 cm的继代芽，接种在含有吲哚乙酸（IAA）、吲哚丁酸（IBA）、蔗糖的1/2改良MS培养基Ⅳ中，诱导处理不定根原基21‑28 d；不定根伸长：将具有肉眼可见不定根外植体转入含有活性炭（AC）或抗坏血酸（Vc）、蔗糖的1/2改良MS培养基Ⅴ中，促进不定根的表达与伸长；试管苗移栽：将已生根的再生植株移栽于泥炭土、蛭石和珍珠岩（1∶1∶1）混合基质中培育，喷水保湿。