[发明专利]基于纳米多孔金片电极的电化学免疫传感器对巯基乙酸的检测

摘要

本发明利用电化学生物传感器的高灵敏度和生物放大技术构建了一种基于纳米多孔金片电极以及HRP标记CRP抗体修饰的纳米金粒子复合物的高灵敏电化学免疫传感器对微量有害物质进行检测。首先制备纳米多孔金片电极，然后在电极表面层层依次修饰目标检测物（巯基乙酸）、抗体、抗原‑金纳米粒子复合物，最后进行电化学检测。金纳米粒子作为支撑材料大大增加了固定的标记抗体的数量，提高了分析检测的灵敏度。

主权项

基于纳米多孔金片电极的电化学免疫传感器对巯基乙酸的检测的方法，步骤包括：(a)HRP标记CRP抗体修饰纳米金粒子的制备：首先制备还原性金纳米粒子，然后将所制备的金纳米粒子溶液调节至碱性，直接将经HRP标记CRP抗体溶液加入至金纳米粒子溶液中，反应结束后将产品离心分离并用PBS缓冲溶液清洗；(b)制备纳米多孔金片电极：将9‑carat白金片在硝酸溶液中浸泡，然后用三次水除去可能影响检测结果的杂质离子，使用抛光粉抛光玻碳电极后将其用蒸馏水洗净，最后通过物理吸附作用且经红外灯照射后，纳米多孔金片就被修饰到玻碳电极上；(c)将步骤(b)中制备的电极浸入至巯基乙酸溶液当中，通过化学反应巯基乙酸会固载至电极表面，反应结束后清洗电极，在电极上滴加CRP抗体溶液，反应结束后清洗电极，用BSA溶液封闭电极，反应结束清洗电极，将电极浸入至CRP溶液中，反应结束后清洗电极，将步骤(a)中产物滴加在电极表面，反应结束后在电极表面得到双抗体夹心免疫复合物；(d)将步骤(c)中电极浸入至OPD和H2O2的混合溶液当中，反应结束后在BR缓冲溶液用电化学工作站测定DPV曲线。