[发明专利]用于序列操纵的CRISPR-CAS组分系统、方法以及组合物有效
| 申请号： | 201380072868.6 | 申请日： | 2013-12-12 |
| 公开（公告）号： | CN105658796B | 公开（公告）日： | 2021-10-26 |
| 发明（设计）人： | 张锋;D.O.比卡德;丛乐;D.B.T.科克斯;P.徐;W.蒋;林帅亮;L.马拉菲尼;R.J.普拉特;然霏;N.E.桑加纳 | 申请（专利权）人： | 布罗德研究所有限公司;麻省理工学院;洛克菲勒大学;哈佛大学校长及研究员协会 |
| 主分类号： | C12N15/63 | 分类号： | C12N15/63 |
| 代理公司： | 北京市金杜律师事务所 11256 | 代理人： | 陈文平 |
| 地址： | 美国马*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | 本发明提供了用于操纵序列和/或靶序列的活性的系统、方法、和组合物。提供了多种载体和载体系统、以及用于设计和使用此类载体的方法，其中一些载体和载体系统编码CRISPR复合物的一个或多个组分。还提供了引导CRISPR复合物在真核细胞中形成的方法以及用于通过利用CRISPR/Cas系统引入精确突变来筛选特异性细胞的方法。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 序列 操纵 crispr cas 组分 系统 方法 以及 组合 | ||
【主权项】：
一种非天然存在的或工程化的组合物，包含一种载体系统，该载体系统包含一个或多个载体，该一个或多个载体包含I.一个第一调节元件，该第一调节元件可操作地连接到CRISPR‑Cas系统嵌合RNA(chiRNA)多核苷酸序列上，其中该多核苷酸序列包含(a)一个指导序列，该指导序列能够杂交到真核细胞中的靶序列上，(b)一个tracr配对序列，和(c)一个tracr序列，以及II.一个第二调节元件，该第二调节元件可操作地连接到编码CRISPR酶的酶编码序列上，在该CRISPR酶的一个末端附近包含至少一个或多个核定位序列(NLS)，其中(a)、(b)和(c)以5’到3’方向排列，其中组分I和II位于该系统的相同或不同载体上，其中在转录时，该tracr配对序列杂交到该tracr序列上，并且该指导序列引导CRISPR复合物与该靶序列的序列特异性结合，其中该CRISPR复合物包含与以下各项复合的CRISPR酶：(1)杂交到该靶序列上的指导序列、和(2)杂交到该tracr序列上的tracr配对序列，并且其中该嵌合RNA多核苷酸序列包括两个或更多个发夹。
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