[发明专利]高感染滴度的细小病毒的生产方法有效
| 申请号： | 201380061077.3 | 申请日： | 2013-09-05 |
| 公开（公告）号： | CN104812893B | 公开（公告）日： | 2018-08-03 |
| 发明（设计）人： | 柳田恒一郎 | 申请（专利权）人： | 旭化成医疗株式会社 |
| 主分类号： | C12N7/00 | 分类号： | C12N7/00 |
| 代理公司： | 北京林达刘知识产权代理事务所(普通合伙) 11277 | 代理人： | 刘新宇;李茂家 |
| 地址： | 日本*** | 国省代码： | 日本;JP |
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| 摘要： | 提供稳定且容易地生产高感染滴度的细小病毒的方法。通过在培养上清中生产108TCID50/mL以上的高感染滴度的细小病毒的方法从而解决上述问题，所述方法包括以下工序：向包含宿主细胞和培养基的培养基材以感染复数成为0.0001～0.1的方式接种细小病毒的种病毒，所述宿主细胞的细胞密度为汇合增殖时的细胞密度的1/500～1/20，以宿主细胞的倍增时间的5～11倍的时间进行培养，对于培养上清进行回收。 | ||
| 搜索关键词： | 感染 细小 病毒 生产 方法 | ||
【主权项】：
1.一种高感染滴度的细小病毒的生产方法，其为通过在培养基材中培养宿主细胞和细小病毒的种病毒，从而在培养上清中生产108TCID50/mL以上的高感染滴度的细小病毒的方法，其包括：工序(a)，事先分别算出所述培养中的宿主细胞的对数增殖期的倍增时间和汇合增殖时的宿主细胞的细胞密度；工序(b)，向包含宿主细胞和培养基的所述培养基材以感染复数即MOI成为0.0001～0.1的方式接种细小病毒的种病毒，所述宿主细胞的细胞密度为工序(a)中事先算出的汇合增殖时的宿主细胞的细胞密度的1/500～1/20；工序(c)，对于工序(b)的包含宿主细胞和细小病毒的培养物以工序(a)中事先算出的倍增时间的5～11倍的时间进行培养；和工序(d)，对于包含通过工序(c)的培养而得到的细小病毒的培养上清进行回收；其中，所述细小病毒为属于细小病毒属的细小病毒；所述宿主细胞为对属于细小病毒属的细小病毒具有感受性的细胞；和所述生产方法得到的高感染滴度的细小病毒溶液中所述细小病毒的感染滴度TCID50/mL与杂质蛋白质浓度ng/mL的比为10:1～5000:1。
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