[发明专利]CAR酶及脂肪醇的改良生产有效

专利信息
申请号: 201380026546.8 申请日: 2013-04-02
公开(公告)号: CN104704113B 公开(公告)日: 2018-01-23
发明(设计)人: 德里克·L·格林菲尔德;伊利莎白·J·克拉克;伊莱·S·格罗班;维克朗斯·阿拉盖达;S·李;X·李;Z·胡;B·朱 申请(专利权)人: REG生命科学有限责任公司
主分类号: C12N9/02 分类号: C12N9/02;C12P7/04;C12P7/64
代理公司: 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所11038 代理人: 袁泉
地址: 美国加*** 国省代码: 暂无信息
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摘要: 发明公开涉及用于在重组宿主细胞中改良生产脂肪醇的变体羧酸还原酶(CAR)。
搜索关键词: car 脂肪 改良 生产
【主权项】:
一种包括如下氨基酸序列的变体羧酸还原酶(CAR)多肽,其中所述的氨基酸序列与SEQ ID NO:7的野生型CAR多肽具有至少99%的序列一致性,其中所述的变体CAR多肽经基因改造,从而在氨基酸位置处具有至少一个突变,其中所述的突变选自D18R、D18L、D18T、D18P、E20V、E20S、E20R、S22R、S22N、S22G、L80R、R87G、R87E、V191S、F288R、F288S、F288G、Q473L、Q473W、Q473Y、Q473I、Q473H、A535S、D750A、R827C、R827A、I870L、V926A、V926E、S927K、S927G、M930K、M930R、L1128W,以及如下组合:(a)突变A535S;(b)突变E20R、F288G、Q473I和A535S;(c)突变E20R、F288G、Q473H、A535S、R827A和S927G;(d)突变E20R、S22R、F288G、Q473H、A535S、R827A和S927G;(e)突变S3R、E20R、S22R、F288G、Q473H、A535S、R873S、S927G、M930R和L1128W;(f)突变D18R、E20R、S22R、F288G、Q473I、A535S、S927G、M930K和L1128W;(g)突变E20R、S22R、F288G、Q473I、A535S、R827C、V926E、S927K和M930R;(h)突变D18R、E20R、288G、Q473I、A535S、R827C、V926E、M930K和L1128W;(i)突变E20R、S22R、F288G、Q473H、A535S、R827C、V926A、S927K和M930R;(j)突变E20R、S22R、F288G、Q473H、A535S和R827C;(k)突变E20R、S22R、F288G、Q473I、A535S、R827C和M930R;(l)突变E20R、S22R、F288G、Q473I、A535S、I870L、S927G和M930R;(m)突变E20R、S22R、F288G、Q473I、A535S、I870L和S927G;(n)突变D18R、E20R、S22R、F288G、Q473I、A535S、R827C、I870L、V926A和S927G;(o)突变E20R、S22R、F288G、Q473H、A535S、R827C、I870L和L1128W;(p)突变D18R、E20R、S22R、F288G、Q473H、A535S、R827C、I870L、S927G和L1128W;(q)突变E20R、S22R、F288G、Q473I、A535S、R827C、I870L、S927G和L1128W;(r)突变E20R、S22R、F288G、Q473I、A535S、R827C、I870L、S927G、M930K和L1128W;(s)突变E20R、S22R、F288G、Q473H、A535S、I870L、S927G和M930K;(t)突变E20R、F288G、Q473I、A535S、I870L、M930K;(u)突变E20R、S22R、F288G、Q473H、A535S、S927G、M930K和L1128W;(v)突变D18R、E20R、S22R、F288G、Q473I、A535S、S927G和L1128W;(w)突变E20R、S22R、F288G、Q473I、A535S、R827C、I870L和S927G;(x)突变D18R、E20R、S22R、F288G、Q473I、A535S、R827C、I870L、S927G和L1128W;(y)突变D18R、E20R、S22R、F288G、Q473I、A535S、S927G、M930R和L1128W;(z)突变E20R、S22R、F288G、Q473H、A535S、V926E、S927G和M930R;或(zz)突变E20R、S22R、F288G、Q473H、A535S、R827C、I870L、V926A和L1128W;其中与表达SEQ ID NO:7的野生型CAR多肽的重组宿主细胞相比,所述的变体CAR多肽在重组宿主细胞中的表达得到更高的脂肪醇组合物的效价。
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