[发明专利]一种益智仁水提物的有效成分的分离方法

摘要

本发明公开了一种益智仁水提物的有效成分的分离方法,属于药物分析领域。该分离方法由以下步骤构成A、取干燥益智仁，粉碎后用水回流提取，合并滤液，减压蒸馏得浸膏，将浸膏溶于蒸馏水中，分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，回收溶剂，得到乙酸乙酯部位干粉；B、将步骤A所得干粉用水溶解，过滤，上葡聚糖凝胶sephadex LH‑20凝胶柱，得到6个组分F1~F6；C、将组分F2~F6进行HPLC分离纯化，得到化合物原儿茶醛、原儿茶酸、对香豆酸、(‑)‑表儿茶素、(+)‑儿茶素。本发明从益智仁中分离提取出有效的活性成分，进一步明确了有效成分的结构，为以后用药提供了根据，可以根据不用的需要提取需要的成分。

主权项

一种益智仁水提物的有效成分的分离方法，其特征在于所述方法由以下步骤构成：A、提取：取干燥益智仁，粉碎后用8‑10倍量水回流提取2次，每次1.5小时，合并滤液，减压蒸馏得浸膏，将浸膏溶于蒸馏水中，分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，回收溶剂，得到乙酸乙酯部位干粉；B、凝胶柱分离：将步骤A所得干粉用水溶解，过滤，上葡聚糖凝胶sephadex LH‑20凝胶柱，以20‑40%乙醇梯度洗脱，收集各段流出物，20%乙醇洗脱得F1,30%乙醇洗脱得F2、 F3、F4，40%乙醇洗脱得F5、F6；C、HPLC纯化：将步骤B所得F2~ F6组分进行HPLC分离纯化，组分F2~ F4的流动相为乙腈‑0.3%甲酸水，梯度洗脱：0~10 min，5%乙腈，95%的 0.3%甲酸水，10~20 min ，5%~ 12% 乙腈，95‑88% 的0.3%甲酸水，20~40 min，12% 乙腈，88% 的0.3%甲酸水，40~60 min ，12%~ 40% 乙腈，88‑60%的 0.3%甲酸水，60~70 min ，40%~ 100% 乙腈，60‑0%的0.3%甲酸水，70~80 min ，100% 乙腈，0%的0.3%甲酸水，得到化合物原儿茶醛、原儿茶酸、对香豆酸；F5~ F6的流动相为乙腈‑水，梯度洗脱：0~10 min 5% 乙腈，95%水， 10~20 min 5%~ 12%乙腈，95‑88%水， 20~40 min ，12% 乙腈，88%水， 40~60 min ，12%~ 40%乙腈，88‑60%水，60~70 min ，40%~ 100%乙腈，60‑0%水，70~80 min ，100% 乙腈，0%水，得到化合物(‑)‑表儿茶素、(+)‑儿茶素。