[发明专利]检测Galectin-3的纳米磁珠分选-时间分辨免疫荧光试剂盒

摘要

检测Galectin-3的纳米磁珠分选-时间分辨免疫荧光试剂盒。试剂盒包括：30nm粒径的超顺磁性复合微粒；偶联液；封闭液；洗涤液；加样缓冲液；荧光增强液；检测缓冲液；捕获抗体；检测抗体；Eu^3＋标记的链亲和霉素；标准品。其使用包括：该试剂盒采用纳米磁珠分选和以双抗体夹心法为基础的时间分辨免疫荧光原理来检测样品中的Galectin-3蛋白的浓度。用偶联有Galectin-3捕获抗体的纳米磁珠富集样品中的Galectin-3，并加入检测抗体孵育，洗涤后加入Eu^3＋标记的链亲和霉素孵育，通过再次洗涤加入荧光增强液，振荡5分钟后用337nm波长光激发，延时200微秒在615nm波长处检测发射荧光值；待检样品中的Galectin-3浓度就可以通过它的荧光值并对应标准曲线得到。待检样品还可以用于下一个目的蛋白的检测。

主权项

检测Galectin‑3的纳米磁珠分选‑时间分辨免疫荧光试剂盒，其特征在于包括以下组成：（1）30nm粒径的超顺磁性复合微粒；（2）偶联缓冲液；（3）磷酸盐缓冲液（PBS），其成分为140mM NaCl，2.7mM KCl， 10mM Na₂HPO₄，1.8mM KH₂PO₄，pH值为7.4；（4）封闭液为含1%BSA的PBS，其成分为PBS，1%BSA；（5）洗涤液为含0.05%Tween‑20的Tris‑HCl 缓冲液（TBS），其成分为50mM的Tris‑HCl 缓冲液（pH 7.8），0.05%Tween‑20；（6）加样缓冲液的成分为含1%BSA的PBS，其成分为PBS，1%BSA；（7）荧光增强液（Enhancement Solution）；（8）检测缓冲液（Assay Buffer）为50mM的Tris‑HCl 缓冲液（pH 7.8），其中含有1%BSA，1%bovine globulin，0.05%Tween 40，DTPA； （9）包被抗体为单克隆小鼠抗人Galectin‑3抗体（Monoclonal Anti‑Human Galectin‑3 Antibody），储存浓度为1μg/μl；（10）检测抗体为生物素化的羊抗人Galectin‑3多抗（Biotinylated Anti‑Human Galectin‑3 Antibody），储存浓度为50ng/μl；（11）Eu^3＋标记的链亲和霉素（Eu^3＋‑labeled streptavidin），储存浓度为0.1μg/μl；（12）标准品，重组人Galectin‑3蛋白（Recombinant Human Galectin‑3），浓度为100μg/μl。