[发明专利]一种甲胎蛋白标准物质定值的方法有效
申请号: | 201310415426.9 | 申请日: | 2013-09-12 |
公开(公告)号: | CN103439399B | 公开(公告)日: | 2019-05-14 |
发明(设计)人: | 宋德伟;徐蓓;胡高飞;孙雪晴;张晓光;李红梅 | 申请(专利权)人: | 中国计量科学研究院 |
主分类号: | G01N27/62 | 分类号: | G01N27/62 |
代理公司: | 北京双收知识产权代理有限公司 11241 | 代理人: | 卢新 |
地址: | 100013 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明提供一种甲胎蛋白标准物质定值的方法,甲胎蛋白是一种肝癌肿瘤诊断标志物,在临床诊断、疾病筛查中具有重要意义。甲胎蛋白标准物质是量值的载体,是实现溯源体系的关键要素,是保证测量结果在时间和空间上的准确性和可比性的重要基础,也是实现有效测量即准确、可比、可溯源测量的根本保证。但是对于其标准物质定值是否准确的研究现在还很少。本发明所解决的技术问题是填补上述技术空白,提供一种甲胎蛋白标准物质定值的方法,具有良好的准确性、可靠性和溯源性。 | ||
搜索关键词: | 一种 蛋白 标准 物质 方法 | ||
【主权项】:
1.一种甲胎蛋白标准物质定值的方法,其特征在于:是以亮氨酸、缬氨酸、脯氨酸和苯丙氨酸标准物质为标准,以同位素标记亮氨酸、缬氨酸、脯氨酸和苯丙氨酸为内标,采用同位素稀释质谱法对甲胎蛋白标准物质进行准确定量;具体步骤为:(1)取甲胎蛋白标准物质20μL于安瓶中,稀释10倍,按1:1的比例分别加入亮氨酸、缬氨酸、脯氨酸和苯丙氨酸标记溶液,真空干燥;(2)加入800μL 6mol/L的HCl,混合均匀后通氮除氧密封,在110℃烘箱中进行水解,每隔12小时涡旋混匀一次;水解48小时后取出,氮气吹干,用含有0.1%盐酸的水溶液复溶,溶液经过0.22μm滤膜过滤后上质谱仪测定;(3)根据质谱所得目标样品与同位素标记氨基酸的比例及配制标准氨基酸与内标氨基酸比例的标准曲线;计算溶液中蛋白含量,根据蛋白的分子量计算每20μL溶液中甲胎蛋白的浓度作为标准物质的定值结果。
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