[发明专利]一种抗寒月季低成本高效工厂化育苗方法

摘要

本发明涉及一种抗寒月季低成本高效工厂化育苗方法，它是由(1)MS培养基及6-BA、NAA母液的配制、(2)培养基的制备、(3)外植体准备、(4)丛生芽的增殖、(5)组培苗的生根、(6)移栽前的准备、(7)移栽。本发明打破传统的用扦插的方式来繁殖抗寒月季，利用植物组织培养技术，来快速繁殖抗寒月季，实现工厂化育苗。

主权项

一种抗寒月季低成本高效工厂化育苗方法，其特征在于：(1)MS培养基及6‑BA、NAA母液的配制按MS培养基的通用配方分别配制大量元素、微量元素、铁盐、有机物母液，为防止出现沉淀，在配制大量元素母液时，配方中的硝酸钙要单独配制，单独盛放，每种母液配成100倍浓缩液，6‑BA母液的配制方法：6‑BA及NAA母液的配制用万分之一精度的天平称取6‑BA0.1g，放入干净的200毫升烧杯中，向烧杯中倒入1摩尔每升的盐酸少许，将6‑BA充分溶解后，将烧杯中的溶液倒入100毫升的容量瓶中，用少量蒸馏水冲洗烧杯1‑2次，冲洗的蒸馏水倒入到容量瓶中，定容到100毫升，将容量瓶中的溶液充分混匀后盛放在棕色瓶中，贴上标签，在标签上标明母液的名称、配制日期及浓度后，备用，NAA母液的配制方法：用万分之一精度的天平称取NAA0.1g，放入干净的200毫升烧杯中，向烧杯中倒入0.1摩尔每升的氢氧化钠少许，将NAA充分溶解后，将烧杯中的溶液倒入100毫升的容量瓶中，用少量蒸馏水冲洗烧杯1‑2次，冲洗的蒸馏水倒入到容量瓶中，定容到100毫升，将容量瓶中的溶液充分混匀后盛放在棕色瓶中，贴上标签，在标签上标明母液的名称、配制日期及浓度后，备用，(2)培养基的制备：将自来水用电饭锅烧开，然后自然冷却。倒出上面清澈的凉开水，倒掉底部沉淀较多的部分，然后用冷却后清澈的凉开水配制培养基，配方为MS+6‑BA0.5‑2.5mg/L+NAA0.01‑0.2mg/L+强度为1200的卡拉胶6.5g/L+白砂糖30g/L，当培养基烧开、定容后，用胶头滴管向每升培养基中加入1摩尔每升的盐酸或氢氧化钠，将培养基的PH值调至5.8‑6.5之间，培养基调酸后在没凝固之前分装在250毫升的玻璃培养瓶中，加盖后高压灭菌，在常温常压下灭菌20分钟后，取出培养基，冷却后，在贮藏室阴凉处放置3‑7天，待观察没有污染后用于后续的月季接种用，(3)外植体准备：选取抗寒月季当年生幼嫩无病虫害的带腋芽枝条， 将选取的外植体剪去叶片、叶柄，剪取1‑2cm的带腋芽茎段，用自来水冲洗15min，先用75％的酒精消毒30s，再用0.1％升汞消毒3‑5min，无菌水冲洗3次，经消毒处理的外植体接种在MS空白培养基上，在培养室内光照培养，光照时间为10‑12h/d，光照强度为20001x，培养室温度25℃±2℃，(4)丛生芽的增殖：上述无菌幼嫩的茎段培养10‑15天左右，茎段上腋芽会长出，待嫩芽长到2‑3厘米时，在无菌条件下将茎段上的嫩芽切下，接种在MS+6‑BA0.5‑2.5mg/L+NAA0.01‑0.2mg/L+强度为1200的卡拉胶6.5g/L+白砂糖30g/L的培养基上，继续放在培养室内增殖培养，光照时间为10‑12h/d，光照强度为20001x，温度25℃±2℃，(5)组培苗的生根将培养瓶中增殖好的、高度为2‑4厘米的月季丛生芽在无菌条件下每单株从基部切下，接种在生根培养基中，生根培养基配方为1/4‑1/2MS+NAA0.1‑1.0mg/L+强度为1200的卡拉胶6.5g/L+白砂糖20g/L，放在培养室光照培养15‑20天，待根长到1.0‑1.5厘米时进行移栽，(6)移栽前的准备在口径为15厘米的塑料花盆或高度为5厘米的塑料育苗盘底部铺大小合适的废报纸，用喷壶将报纸打湿，然后向花盆或育苗盘中加入蛭石，离花盆或苗盘边缘1厘米时，用尺子将蛭石刮平，再用喷壶将花盆或苗盘中的蛭石浇透，沥干水，待用，(7)移栽当瓶中的月季小苗根长到1.0‑1.5厘米时，打开瓶盖，用镊子将月季小苗夹出，放在清水中洗去根部培养基，将苗栽入上述准备好的花盘或苗盘里的蛭石中，然后用喷壶浇一遍合适浓度的生根剂，将栽苗时弄松的蛭石弥实，沥干水，花盆可用小而薄的塑料购物袋套上，育苗盘则可用2根细铁丝支起，然后用地膜覆盖住苗盘，地膜和苗盘接触部用透明胶带封严，将花盆或苗盘放在培养室内温度20℃±2℃进行培养光照培养，10天后将塑料薄膜用剪刀在薄膜上开直径为1.0‑1.5厘米的小孔，逐渐降低花盆或苗盘内空气湿度，开小孔后6‑8天将薄膜全部揭去，炼苗15天后即可将小苗移栽到事先配制好的营养土中。