[发明专利]以蜂胶为原料的保健食品中总皂苷的测定方法

摘要

本发明涉及一种保健食品中总皂苷的测定方法，尤其是涉及一种以蜂胶为原料的保健食品中总皂苷的测定方法。本发明包括标准曲线制作工序、样品处理工序、试液过柱工序、显色工序和总皂苷计算工序，标准曲线制作工序中，采用吸光度值和人参皂苷的质量做曲线，得到标准曲线，样品处理工序中，取以蜂胶为原料的保健食品0.3g得到待测试液，试液过柱工序中，采用层析柱对待测试液进行过柱操作，得到待测试液挥干蒸发皿，显色工序中，得到待测试液的吸光度值，总皂苷计算工序中，得到以蜂胶为原料的保健食品中总皂苷的含量。本发明提取方法简单，回收率高，准确性好，简便快速。

主权项

一种以蜂胶为原料的保健食品中总皂苷的测定方法，其特征在于：该测定方法包括标准曲线制作工序、样品处理工序、试液过柱工序、显色工序和总皂苷计算工序；所述标准曲线制作工序中，分别吸取0ml、10ml、20ml、40ml、60ml、80ml、100ml和120ml已知浓度的人参皂苷Re标准液置于八个蒸发皿中，待蒸发皿中的人参皂苷Re标准液干燥后，先加入5ml摩尔浓度为0.1M的氢氧化钠溶液，再加水20ml，摇匀后用盐酸调节pH值为6.5‑7.0，从而得八份标准母液，将八份标准母液置于45‑55℃的水浴中超声20‑40min破乳，冷却到常温，分别采用50ml的容量瓶用水定容到50ml，摇匀后过滤，弃去5ml初滤液，取1.0ml续滤液做为标准试液，从而得到八份标准试液；采用层析柱对每份标准试液进行过柱操作，先用25mL体积百分比为70%的乙醇洗柱，弃去洗脱液，再用25mL水洗柱，弃去洗脱液，精确加入1.0mL标准试液，过柱，用25mL的水洗柱，以洗去糖份等水溶性杂质，弃去洗脱液，用25mL体积百分比为70%的乙醇洗脱人参皂苷，收集洗脱液于蒸发皿中，放水浴中挥干，从而得到八个挥发后的蒸发皿；在已挥干的蒸发皿中准确加入0.2mL体积百分比为5%的香草醛冰乙酸溶液，转动蒸发皿，使残渣都溶解，再加0.8mL高氯酸，混匀后移入5mL带塞刻度离心管中，放在60℃以下的水浴中加热10min，取出，冰浴冷却后，准确加入冰乙酸5.0mL，摇匀后，以1cm比色皿于560nm波长处与标准管一起进行比色测定，从而得到八个吸光度值；一个吸光度值和一个蒸发皿中含有的人参皂苷的质量相对应，采用吸光度值和人参皂苷的质量做曲线，得到标准曲线；所述样品处理工序中，取以蜂胶为原料的保健食品0.3g置于50ml容量瓶中，加入5ml摩尔浓度为0.1M的氢氧化钠溶液来溶解保健食品，待保健食品溶解后，加水20ml，摇匀后用盐酸调节pH值为6.5‑7.0，在45‑55℃的水浴中超声20‑40min破乳，冷却到常温，用水定容到50ml，摇匀后过滤，弃去5ml初滤液，取1.0ml续滤液做为待测试液；所述试液过柱工序中，采用层析柱对待测试液进行过柱操作，先用25mL体积百分比为70%的乙醇洗柱，弃去洗脱液，再用25mL水洗柱，弃去洗脱液，精确加入1.0mL待测试液，过柱，用25mL的水洗柱，以洗去糖份等水溶性杂质，弃去洗脱液，用25mL体积百分比为70%的乙醇洗脱人参皂苷，收集洗脱液于蒸发皿中，放水浴中挥干，得到待测试液挥干蒸发皿；所述显色工序中，在待测试液挥干蒸发皿中准确加入0.2mL体积百分比为5%的香草醛冰乙酸溶液，转动蒸发皿，使残渣都溶解，再加0.8mL高氯酸，混匀后移入5mL带塞刻度离心管中，放在60℃以下的水浴中加热10min，取出，冰浴冷却后，准确加入冰乙酸5.0mL，摇匀后，以1cm比色皿于560nm波长处与标准管一起进行比色测定，从而得到待测试液的吸光度值，该吸光度值和以蜂胶为原料的保健食品相对应；所述总皂苷计算工序中，将待测试液的吸光度值代入标准曲线中，得到待测试液中含有的人参皂苷的质量，从而得到以蜂胶为原料的保健食品中总皂苷的含量。