[发明专利]一种血浆肾素活性的测定方法及其应用无效
| 申请号： | 201310024180.2 | 申请日： | 2013-01-22 |
| 公开（公告）号： | CN103116017A | 公开（公告）日： | 2013-05-22 |
| 发明（设计）人： | 宁光;刘聪;王卫庆;苏颋为;周薇薇;崔斌 | 申请（专利权）人： | 上海市内分泌代谢病研究所 |
| 主分类号： | G01N33/53 | 分类号： | G01N33/53;G01N33/531 |
| 代理公司： | 上海伯瑞杰知识产权代理有限公司 31227 | 代理人： | 吴瑾瑜 |
| 地址： | 200025 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种血浆肾素活性的测定方法和应用，本发明通过酶促反应-血管紧张素I的生成进而免疫测定，以B/T(%)或B/B0(%)的自然对数为横坐标，以标准品的血管紧张素I浓度为横坐标作图。对应样品37℃或4℃各自位于横坐标的B/T(%)或B/B0(%)自然对数值，读出纵坐标相应的血管紧张素I浓度。计算血浆肾素活性：血浆肾素活性是间接测定每小时体外生成血管紧张素I的量。由37℃生成的血管紧张素I浓度减去4℃的基础浓度得到。通过本发明提供的血浆肾素活性的测定方法，所得出的血浆肾素活性可以应用于计算醛固酮/肾素比值（ARR），进而可以早期诊断高血压患病情况。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 血浆 活性 测定 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
一种血浆肾素活性的测定方法，其特征在于：其步骤为：1）准备储存液：a、准备酶促反应抑制液：在小管内加入标注体积的去离子水，轻轻混匀，抑制液应贮存在2‑8℃；b、贮备冲洗液：把小管内液体倒入950ml去离子水中，混匀，贮存在2‑8℃；2）酶促反应‑血管紧张素I的生成：a、在200ul样品血清中加入200ul预冷的酶促反应抑制液，轻轻混匀；b、把每份混合液平均分成两份200ul，分别转移到两个小管中；c、把第一份小管液放入4℃水浴中，振荡孵育1小时，用来测定血管紧张素I的基础浓度；d、把第二份小管液放入37℃水浴中，振荡孵育1小时，用来测定生成的血管紧张素I浓度；e、孵育结束，把第二份小管液从37℃迅速降温至4℃；3）免疫测定：在抗体包被管内依次加入50ul标准品、50ul经37℃和4℃孵育的三份样品加入示踪剂200ul，混匀；18‑25℃振荡孵育2小时，振速大于280rpm；除空白管外，终止孵育；用2ml冲洗液冲洗；终止两次；测定活性一分钟；标准曲线：以B/T(%)或B/B0(%)的自然对数为横坐标，以标准品的血管紧张素I浓度为横坐标作图；样品血清：对应样品37℃或4℃各自位于横坐标的B/T(%)或B/B0(%)自然对数值，读出纵坐标相应的血管紧张素I浓度；计算血浆肾素活性：血浆肾素活性是间接测定每小时体外生成血管紧张素I的量；由37℃生成的血管紧张素I浓度减去4℃的基础浓度得到。
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