[发明专利]促进大鼠神经干细胞分化的方法有效
| 申请号： | 201310001051.1 | 申请日： | 2013-01-05 |
| 公开（公告）号： | CN103343108A | 公开（公告）日： | 2013-10-09 |
| 发明（设计）人： | 黄慧玲;范维佳;武俏丽;蔡英;王辰;莫丽冬 | 申请（专利权）人： | 天津市环湖医院 |
| 主分类号： | C12N5/0793 | 分类号： | C12N5/0793 |
| 代理公司： | 天津市宗欣专利商标代理有限公司 12103 | 代理人： | 董光仁 |
| 地址： | 300060 *** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种促进大鼠神经干细胞分化的方法，属于未分化细胞的培养。本发明先将孕13天SD大鼠胎鼠取大脑组织剪碎，消化成单细胞，离心，用神经干细胞完全培养液悬浮细胞，过筛，培养，得高纯度的大脑神经干细胞；再将培养至第2代的神经干细胞收集并离心，用神经元完全培养液加5%胎牛血清接种到已涂布鼠尾胶原的24孔板内，令细胞贴壁，细胞分化第1天开始用神经元完全培养液，每孔同时加入100×100μmol/L牛磺酸10μl，共培养12天即得分化神经元的神经干细胞。这样设计的本发明具有的有益效果是：培养液成分简单、成本低；添加的牛磺酸体内存在，使用安全；能够提高生成成熟神经元的数量。 | ||
| 搜索关键词： | 促进 大鼠 神经 干细胞 分化 方法 | ||
【主权项】：
一种促进大鼠神经干细胞分化的方法，其是按以下步骤进行的：a. 胎鼠大脑神经干细胞培养，孕13天SD大鼠胎鼠取大脑组织，剪碎，用0.25%胰蛋白酶和0.02%乙二胺四乙酸二钠，消化成单细胞，离心；用神经干细胞完全培养液悬浮细胞，过筛，收集细胞滤液，于37℃、体积分数为5% CO2和95% 空气、绝对湿度条件下进行培养，每隔1天换瓶培养液；得高纯度的大脑神经干细胞；b. 神经元分化，将培养至第2代的神经干细胞收集并离心，用神经元完全培养液加5%胎牛血清接种到已涂布鼠尾胶原的24孔板内，每孔1ml，令细胞贴壁，24小时后弃上清，细胞分化第1天开始用神经元完全培养液，每孔同时加入100×25‑100μmol/L牛磺酸10μl，每3天换液1次，共培养12天即得分化神经元的神经干细胞。
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