[发明专利]使用离子交换膜层析改进下游蛋白质纯化步骤的方法有效
| 申请号： | 201280070369.9 | 申请日： | 2012-12-18 |
| 公开（公告）号： | CN104125963B | 公开（公告）日： | 2018-08-17 |
| 发明（设计）人： | J·J·小比尔;A·M·布朗;C·J·多德;B·E·塞耶 | 申请（专利权）人： | 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 |
| 主分类号： | C07K1/18 | 分类号： | C07K1/18 |
| 代理公司： | 北京市中咨律师事务所 11247 | 代理人： | 黄革生;林柏楠 |
| 地址： | 瑞士*** | 国省代码： | 瑞士;CH |
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| 摘要： | 提高用于纯化蛋白质的下游层析步骤的效率的方法，其包括：(a)在包含缓冲液的操作条件下，使包含目的多肽和多种污染物的组合物通过离子交换膜，其中所述多肽和膜具有相反的电荷，所述缓冲液具有足以与所述多肽的pI区分开来以增加所述多肽的电荷的pH和有效防止缓冲液离子屏蔽电荷的低离子强度，所述操作条件导致所述膜与所述多肽以及至少一种污染物结合；(b)过载所述离子交换膜，以使所述至少一种污染物仍与膜结合，而所述目的多肽主要在流出物中；(c)从所述离子交换膜收集包含所述目的多肽的流出物；(d)使包含所述目的多肽的膜流出物进行与前述膜带相似电荷的纯化步骤，和(e)从所述带电荷的离子交换层析纯化步骤的流出物中回收纯化的多肽。 | ||
| 搜索关键词： | 多肽 电荷 流出物 离子交换膜 缓冲液 污染物 离子交换层析 离子交换膜层 蛋白质纯化 离子屏蔽 膜结合 下游层 过载 膜带 蛋白质 离子 回收 改进 | ||
【主权项】：
1.提高用于纯化抗体的下游层析步骤的效率的方法，其包括：a.在包含缓冲液的操作条件下，使包含目的抗体和多种污染物的组合物通过离子交换膜，其中所述抗体和膜具有相反的电荷，所述缓冲液具有足以与所述抗体的pI区分开来以增加所述抗体的电荷的pH和有效防止缓冲液离子屏蔽电荷的低离子强度，所述操作条件导致所述膜与所述抗体以及至少一种污染物结合；b.过载所述离子交换膜至1000‑5000g/L的装载密度，以使所述至少一种污染物仍与膜结合，而所述目的抗体主要在流出物中；c.从所述离子交换膜收集包含所述目的抗体的流出物；d.使包含所述目的抗体的膜流出物进行与前述膜带相似电荷的离子交换层析步骤，和e.从带电荷的离子交换层析步骤的流出物中回收纯化的抗体，其中所述污染物是离子聚合物。
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