[发明专利]对应于转基因事件KK179-2的苜蓿植物和种子及其检测方法有效

专利信息
申请号: 201280032382.5 申请日: 2012-06-28
公开(公告)号: CN103857798B 公开(公告)日: 2018-06-15
发明(设计)人: C·利弗林;D·惠伦;S·坦普尔;M·麦卡斯林;M·S·雷迪;W·希亚特;W·伯恩斯;R·E·塞尔尼 申请(专利权)人: 孟山都技术公司;福拉格遗传国际有限公司
主分类号: C12N15/82 分类号: C12N15/82;A01H5/12;C12Q1/6895
代理公司: 北京市金杜律师事务所 11256 代理人: 陈文平
地址: 美国密*** 国省代码: 美国;US
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摘要: 发明提供了转基因苜蓿事件KK179‑2。本发明还提供了与所述事件相关的细胞、植物部分、种子、植物、商品以及对于所述事件是独特的并且通过将转基因DNA插入苜蓿植物的基因组来产生的DNA分子。本发明进一步提供了用于检测所述苜蓿事件核苷酸序列在样本中的存在的方法,用于检测诊断所述苜蓿事件的存在的核苷酸序列的探针和引物。 1
搜索关键词: 核苷酸序列 苜蓿植物 检测 苜蓿 转基因事件 转基因苜蓿 转基因DNA 基因组 探针 引物 样本 细胞 诊断
【主权项】:
1.一种包含事件KK179‑2的苜蓿植物部分,其来源于包含事件KK179‑2的苜蓿植物种子,所述包含事件KK179‑2的种子以专利保藏号PTA‑11833保藏于美国典型培养物保藏中心(ATCC),其中所述苜蓿植物部分是非可再生的。

2.如权利要求1所述的包含事件KK179‑2的苜蓿植物部分,其包含花粉、胚珠、花、芽、根或叶。

3.如权利要求1或2所述的包含事件KK179‑2的苜蓿植物部分,其基因组产生包含选自SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4的DNA分子的扩增子。

4.一种重组DNA分子,其包含

a.其序列如SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的多核苷酸分子;或

b.与a)互补的多核苷酸分子。

5.如权利要求4所述的DNA分子,其中所述DNA分子包含于苜蓿植物、植物细胞、种子、后代植物、植物部分或商品中。

6.如权利要求4所述的重组DNA分子,包含其序列如SEQ ID NO:6所示的多核苷酸分子。

7.如权利要求4所述的DNA分子,其中所述DNA分子来源于事件KK179‑2,且其中包含事件KK179‑2的种子已于ATCC登录号PTA‑11833下保藏。

8.如权利要求4所述的DNA分子,其中所述DNA分子是由来源于事件KK179‑2的DNA的模板分子产生的扩增子。

9.一种诊断事件KK179‑2DNA的存在的多核苷酸探针,其中所述多核苷酸探针具有充分长度以结合包含SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2或其互补序列的核酸分子,并且其中所述多核苷酸探针在严格杂交条件下与包含SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2或其互补序列的DNA分子杂交,并且在严格杂交条件下不与不包含SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或其互补序列的DNA分子杂交,其中所述探针选自SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2。

10.一种检测来源于事件KK179‑2的DNA分子在DNA样本中的存在的方法,所述方法包括:

a.将所述DNA样本与根据权利要求9所述的多核苷酸探针接触;

b.将所述DNA样本和所述多核苷酸探针经历严格杂交条件;和

c.检测所述多核苷酸探针对所述DNA样本中的来源于事件KK179‑2的所述DNA分子的杂交。

11.一种DNA分子对,其由第一DNA分子和与所述第一DNA分子不同的第二DNA分子组成,其中所述第一和第二DNA分子包含具有SEQ ID NO:6的足够长度的连续核苷酸的核苷酸序列或其互补序列的多核苷酸分子,且其中所述第一DNA分子存在于SEQ ID NO:6的转基因插入DNA序列,和所述第二DNA分子存在于SEQ ID NO:6的苜蓿转基因DNA序列,以用作当与来源于事件KK179‑2的模板一起用于扩增反应时产生诊断样本中的事件KK179‑2DNA的扩增子的DNA引物,其中所述扩增子包含SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2的核苷酸序列。

12.一种DNA检测试剂盒,其包含:

a)其由第一DNA分子和与所述第一DNA分子不同的第二DNA分子组成,其中所述第一和第二DNA分子各自包含具有SEQ ID NO:6的足够长度的连续核苷酸的核苷酸序列或其互补序列的核苷酸序列,且其中所述第一DNA分子存在于SEQ ID NO:6的转基因插入DNA序列,和所述第二DNA分子存在于SEQ ID NO:6的苜蓿转基因DNA序列,以用作当与来源于事件KK179‑2的模板一起用于扩增反应时产生诊断样本中的事件KK179‑2DNA的扩增子的DNA引物,其中所述扩增子包含SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2的核苷酸序列;或

b)至少一种诊断事件KK179‑2的DNA探针,其中所述DNA探针具有充分长度以结合包含SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2或其互补序列的核酸分子,并且其中所述DNA探针在严格杂交条件下与包含SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2或其互补序列的DNA分子杂交,并且在严格杂交条件下不与不包含SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或其互补序列的DNA分子杂交,其中所述DNA探针选自SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2。

13.一种微生物,其包含如权利要求4所述的DNA分子。

14.一种植物细胞,其包含如权利要求4所述的DNA分子,其中所述植物细胞是非可再生的。

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