[发明专利]用于异丁醇生产的宿主细胞和方法

摘要

本文提供了产生异丁醇的重组酵母宿主细胞及其使用方法。所提供的酵母宿主细胞包含异丁醇生物合成途径和降低或消除的醛脱氢酶活性、降低或消除的乙酰乳酸还原酶活性中的至少一个；或编码具有酮醇酸还原异构酶活性的多肽的异源多核苷酸。

主权项

重组宿主细胞，其包含：工程化的异丁醇生产途径；下列中的至少一个：a） 具有酮醇酸还原异构酶（KARI）活性的异源多肽，其由以下组成：SEQ ID NO: 27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、417、419、421、423、425、427、429、431、433、434、435、436、437、438、439、440、441、442、443、444、445、446、447、448、449、450、451、452、453、454、455、456、457、458、459、460、461、462、463、464、465、466、467、468、469、470、471、472、473、474、475、476、477、478、479、480、481、482、483、484、485、486、487、488、489、490、491、492、493、494、495、496、497、498、499、500、501、502、503、504、505、506、507、508、509、510、511、512、513、514、515、516、517、518、519、520、521、522、523、524、525、526、527、528、529、530、531、532、533、534、535、536、537、624、626、628、630、632、873、874、875、876、877、878、879、880、881、882、883、933、934、935、936、937、938、927、928、196或637的氨基酸序列；或b） 编码a）的具有KARI活性的异源多肽的异源多核苷酸；和至少一个宿主细胞修饰，所述宿主细胞修饰包括消除的醛脱氢酶表达或活性，其中所述宿主细胞修饰包括编码具有醛脱氢酶活性的多肽的内源多核苷酸中缺失、突变、或替换中的至少一个，并且其中所述多肽由SEQ ID NO: 741的氨基酸序列组成；其中所述工程化的异丁醇生产途径包括下列底物至产物的转化：i. 丙酮酸至乙酰乳酸；ii. 乙酰乳酸至2,3‑二羟基异戊酸；iii. 2,3‑二羟基异戊酸至2‑酮异戊酸；iv. 2‑酮异戊酸至异丁醛；以及v. 异丁醛至异丁醇；其中所述重组宿主细胞是糖酵母属（Saccharomyces）。