[发明专利]一种小鼠胰岛细胞的分离纯化方法无效
| 申请号： | 201210563477.1 | 申请日： | 2012-12-21 |
| 公开（公告）号： | CN103013907A | 公开（公告）日： | 2013-04-03 |
| 发明（设计）人： | 宁光;李峰;曹亚南;姜秀丽 | 申请（专利权）人： | 上海市内分泌代谢病研究所 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 上海伯瑞杰知识产权代理有限公司 31227 | 代理人： | 吴瑾瑜 |
| 地址： | 200025 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明属于细胞分离技术领域，特别涉及一种小鼠胰岛细胞的分离方法，将小鼠麻醉、皮肤消毒后沿腹正中切开，充分暴露胰腺；剪断与脾部胰腺相连接的韧带组织，将脾静脉和脾交界处夹闭并剪破心脏，在脾静脉与门静脉交汇处进针至脾静脉，注射胶原酶充盈液；将充盈好的脾部胰腺从腹腔中游离下来后浸渍在胶原酶充盈液中。将胰腺胶原酶溶液水浴消化，并加入Hank’s液后离心分离，取沉降物。将沉降物经过重悬沉淀、过滤、离心处理后得到小鼠胰岛细胞。本发明的小鼠胰岛细胞分离纯化的方法在操作上简单、易行，而且所分离到的胰岛细胞在形态上和功能上和CBD法没有明显差异，丰富了小鼠胰岛分离的可选技术，提高了分离功率。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 小鼠 胰岛 细胞 分离 纯化 方法 | ||
【主权项】：
一种小鼠胰岛细胞的分离纯化方法，其步骤包括：（1）胰腺充盈：将小鼠麻醉、皮肤消毒后沿腹正中切开，充分暴露胰腺；剪断与脾部胰腺相连接的韧带组织，将脾静脉和脾交界处夹闭并剪破心脏，在脾静脉与门静脉交汇处进针至脾静脉，注射胶原酶充盈液；将充盈好的脾部胰腺从腹腔中游离下来后浸泡在胶原酶充盈液中；（2）胰腺消化：将步骤（1）中得到的胰腺用胶原酶溶液水浴消化，并加入Hank’s液后离心分离，取沉降物。（3）分离纯化：在步骤（2）中得到的沉降物经过重悬沉淀、过滤、离心处理后得到小鼠胰岛细胞。
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