[发明专利]从裂壶藻中浓缩和纯化DHA、EPA的方法

摘要

本发明公开了一种从裂壶藻中浓缩和纯化DHA、EPA的方法，包括裂壶藻预处理，尿素包合法分离饱和脂肪酸和低不饱和脂肪酸，银离子络合法分离DHA和EPA的步骤。采用2种技术联合萃取工艺，DHA和EPA纯度可达90%以上，不需要复杂昂贵的设施，不需要极端生产条件如超低温，高压等，绝大部分试剂和剩余物可以回收利用，因而没有大量的三废排放，可以规模化分离，利于产业化开发。

主权项

一种从裂壶藻中浓缩和纯化DHA、EPA的方法，其特征在于：包括以下步骤：一、裂壶藻预处理，高温喷雾干燥法，调整发酵液中生物量为20%左右，处理温度120℃，用喷雾干燥器，喷雾快速脱水，干燥，藻壁快速收缩开裂，得到破壁裂壶藻；在破壁裂壶藻中加入是其质量2倍石油醚搅拌30min，用碟式离心机连续离心，去除固形物，石油醚置蒸馏器50℃，蒸馏回收石油醚，剩余物为裂壶藻油脂；二、尿素包合法分离饱和脂肪酸和低不饱和脂肪酸，将尿素加入无水甲醇中，加热至50℃，搅拌成尿素乙醇饱和溶液；将裂壶藻油脂1份和甲醇3份相互混合，同时加入固体重量为油脂重量1%的NAOH搅拌加热，温度在50‑70℃间，回流20min，得到裂壶藻脂肪酸甲酯及甘油和未反应的藻油甘油甲酯，冷却后，水洗其甘油；将脂肪酸甲酯加入其2倍量尿素甲醇溶液，搅拌加热50℃，反应30min，冷却至0℃，包合数小时，形成尿素包合体，液相部分为高度不饱和脂肪酸；用碟式离心机，固液分离，收集液相部分，固相脲包物回收油脂；液相部分用70℃进行蒸馏，回收甲醇，保留多不饱和脂肪酸甲酯；多不饱和脂肪酸甲酯经冷水洗出残余尿素，静止，分层，弃除水相，油相为含有高比值的DHA；三、银离子络合法分离DHA和EPA，多不饱和脂肪酸甲酯溶解于丙酮中成丙酮溶液，硝酸银溶于蒸馏水中，浓度为20%，成硝酸银溶液，硝酸银溶液和丙酮溶液等量相混，在0℃状态，搅拌30min，继续静止2小时，成DHA硝酸银络合物水溶液，油水分离；用正己烷从DHA硝酸银络合物水溶液中提取DHA，抽提3次，合并正己烷，蒸馏，加温至69℃，挥发回收正己烷，最后产物为DHA；配制成75%浓度的硝酸银溶液，提取油相中EPA，温度为45℃，搅拌30min，静止2小时，用正己烷提取油相中的EPA，蒸馏挥发回收正己烷，产物为EPA。