[发明专利]一种基于石墨烯的双酶葡萄糖传感器的制备方法

摘要

本发明涉及一种基于石墨烯的双酶葡萄糖传感器的制备方法，属于材料制备技术领域。本发明主要是将离子液体功能化修饰石墨烯改善其分散性，再将其与铂纳米粒子联用，以促进电子的传递，运用层层自组装法修饰到玻碳电极上，再利用生物信号增敏放大效应，结合葡萄糖氧化酶和辣根过氧化氢酶两种酶，在4℃下干燥24小时，使电极表面形成一层均匀的复合膜，制备双酶葡萄糖传感器，用于葡萄糖的快速电化学测定。本发明制备的纳米复合材料生物相容性好，利于生物酶的固定且制备方法成本低，简单快捷。本发明制作的生物传感器灵敏度高，稳定性好，线性范围宽，具有一定的抗干扰能力，可广泛应用到糖尿病诊断和食品工艺监测等方面。

主权项

一种基于石墨烯的双酶葡萄糖传感器的制备方法，其特征在于具体步骤如下：（1）功能化石墨烯的制备：将10mg的离子液体加入到0.5mg/mL的氧化石墨水溶液中超声50‑70分钟，得到均匀分散的混合物；而后加入10 mg KOH，超声20‑40分钟，得到透明均一的溶液；在60~80℃温度下，回流反应24~48小时，得到功能化石墨烯，所得产物离心，用乙醇、水洗至中性，真空干燥；（2）Pt纳米粒子的制备：将1wt% H2PtCl6的水溶液1ml加入到100ml水中，加热至沸点温度；再加入1wt%的柠檬酸钠水溶液3ml，保持沸点温度反应1~3小时，得到Pt纳米粒子；（3）双酶葡萄糖传感器的制备： a．玻碳电极的预处理：首先将玻碳电极用金相砂纸抛光，再依次用1.0μm、0.3μm和0.05μm的Al2O3悬浮液在麂皮上抛光至镜面，最后分别用体积比为1:1的HNO3溶液、无水乙醇和二次蒸馏水超声清洗干净，备用；b．修饰玻碳电极的制备：将预处理好的玻碳电极在步骤（1）得到的0.05M功能化石墨烯分散液中浸泡20‑40分钟，用二次蒸馏水洗去未吸附上的功能化石墨烯；再在步骤(2)中所述的Pt纳米粒子中浸泡20‑40分钟，用二次蒸馏水洗去未吸附上的Pt纳米粒子，如此反复2‑5次，氮气气氛中，自然晾干；最后在由葡萄糖氧化酶和辣根过氧化氢酶组成的壳聚糖分散液中，在3‑5℃温度下，浸泡10‑14小时；再用pH=7.4的PBS磷酸盐缓冲液洗涤，在该温度下，氮气气氛中，干燥，得到基于石墨烯的双酶葡萄糖传感器。